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目的肺癌转移相关转录本1(Metastasis associated lung adenocarcinoma transcript1,MALAT1)是最早发现的长链非编码RNA之一,研究显示,MALAT1在人类多种疾病,尤其是恶性肿瘤发生发展、演进中发挥重要作用。MALAT1在食管癌,胶质瘤,肾癌等多种人类恶性肿瘤中异常表达,是肿瘤预后不良的因素。本课题组前期研究发现,在口腔鳞癌中,MALAT1高表达与患者预后差密切相关,提示MALAT1可能参与口腔鳞癌恶性进展。本文旨在探讨MALAT1对口腔鳞状细胞癌增殖、凋亡及迁移侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法1.收集69例口腔鳞癌组织标本并进行免疫组织化学染色,分析β-catenin及VHL蛋白在口腔鳞癌中与性别、年龄、肿瘤原发部位、T分期、组织学分级及淋巴结转移的关系,并对VHL与β-catenin蛋白之间表达关系进行相关性分析。2.运用细胞转染的方法敲低MALAT1在口腔鳞癌细胞系SCC25及UM1中的表达,运用CCK8、平板克隆实验检测MALAT1对细胞增殖能力的影响;流式细胞计数检测敲降后MALAT1对细胞周期及凋亡的影响;Transwell及细胞迁移实验检测MALAT1对口腔鳞癌细胞系迁移侵袭能力的影响;Western blot检测细胞周期、凋亡、及EMT相关蛋白的表达变化,同时检测敲低MALAT1在口腔鳞癌细胞系中的表达后β-catenin及VHL蛋白的表达变化。结果1.69例患者免疫组化结果显示,VHL低表达与组织分化程度差及淋巴结转移有关,与性别、年龄、肿瘤原发部位、T分期无关,β-catenin高表达与淋巴结转移有关,与性别、年龄、肿瘤原发部位、T分期及组织学分化程度无关。VHL与β-catenin表达呈负相关。2.敲低MALAT1在口腔鳞癌细胞系中的表达后,MALAT1 si RNA组相较于阴性对照组,细胞平板克隆形成能力降低,细胞的增殖能力减弱,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,细胞周期进程受到了阻滞,细胞周期素Cyclin D1表达下调,细胞周期抑制蛋白P21表达上调;细胞凋亡增多,Cleaved caspase-3及Bax表达上调;E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vimentin表达下调,EMT发生逆转,MMP-2、MMP-9表达下调,细胞的迁移和侵袭能力下降。同时发现下调MALAT1在口腔鳞癌细胞系的表达后,VHL表达上调,β-catenin表达下调。结论1.在口腔鳞癌组织中VHL表达水平与组织学分化程度及肿瘤淋巴结转移相关,β-catenin表达水平与肿瘤淋巴结转移相关。VHL与β-catenin表达呈负相关。2.MALAT1在口腔鳞癌中可以发挥促进肿瘤细胞的生长增殖、抑制肿瘤细胞凋亡的作用,并可以通过诱导EMT过程促进口腔鳞癌细胞的迁移侵袭。3.在口腔鳞状细胞癌中MALAT1可能通过VHL/β-catenin通路发挥对口腔鳞癌生长侵袭的调节作用。