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目的：探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗的作用及机制。了解5种人类非小细胞肺癌细胞系A549、H322、H358、H460、H1299的HER2和EGFR蛋白表达水平，探讨5种细胞系HER2蛋白表达水平与顺铂IC50之间的关系；观察HER2和EGFR小分子酪氨酸激酶抑制剂AG825和AG1478对5种细胞系的生长抑制作用；观察AG825、AG1478联合顺铂对5种细胞系的协同生长抑制作用；研究AG825、AG1478联合顺铂对H322、H1299细胞系细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡和坏死的影响；研究AG825、AG1478联合顺铂所致H322、H1299细胞系EGFR、磷酸化ERK和总ERK表达的变化，探讨协同生长抑制作用的机制。 方法：(1)体外培养5种NSCLC细胞系A549、H322、H358、H460、H1299。采用Western印迹法，检测5种细胞系HER2和EGFR蛋白表达；(2)采用体外药物敏感性试验(MTT比色法)，观察AG825、AG1478、顺铂、紫杉醇对5种细胞系的生长抑制作用；(3)采用体外药物敏感性试验(MTT比色法)，观察AG825联合顺铂，AG1478联合顺铂对5种细胞系的协同生长抑制作用；(4)将体外培养的H322、H1299细胞分设6组：①正常对照组，②顺铂组，③AG825组，④AG1478组，⑤顺铂+AG825组，⑥顺铂+AG1478组，顺铂浓度为0.1μm，AG825浓度为40μm，AG1478浓度为5μm。采用体外细胞增殖试验，观察AG825、AG1478联合顺铂对H322、H1299细胞系细胞增殖的影响：(5)采用流式细胞术，检测AG825、AG1478联合顺铂引起H322、H1299细胞系细胞周期的变化。(6)采用Annexin V-EGFP凋亡试剂盒，用流式细胞中文摘要术的方法，检测AG825、AG1478联合顺铂所致H322、H1299细胞凋亡和坏死率的变化。(7)采用W己Stem印迹法，观察AG825、AG1478联合顺铂对H322、H1299细胞系EGFR、磷酸化ERK和总ERK表达的影响。 结果:(1)5种NscLc细胞系HERZ蛋白的表达水平不同，H322的HERZ蛋白表达水平最高，其次为H358和A549，H46O和H1299的HERZ蛋白表达水平最低。5种 NSCLC细胞系EGFR蛋白的表达水平不同，A549、H322的EGFR蛋白表达水平最高，其次为H358和I诬1299，H460的EGFR蛋白表达水平最低。(2)HERZ特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂AG825对5种NSCLC细胞系有显著的生长抑制作用，这种抑制作用具有时间依赖性和浓度依赖性，并与细胞系HERZ蛋白表达水平不相关。FGFR特异性小分子酪氨酸激酶抑制剂AG1478对5种NSCLc细胞系有显著的生长抑制作用，这种抑制作用具有时间依赖性和浓度依赖性，并与细胞系EGFR蛋白表达水平不相关，可能与HERZ高表达、同时表达EGFR有关。紫杉醇浓度很低(o.lnm)时即对5种NSCLC细胞系有显著的生长抑制作用，但剂量增加后，这种生长抑制作用没有明显增加，当剂量增加到I000nm以上时，反倒出现促进细胞增殖的现象。顺铂又寸A549、H322、H358、H46O、H129‘)细胞系的IC50(半数抑制浓度)分别为7.31林m、16.29协m、12.88林m、4.513林m、1.769卜m。5种NSCLC细胞系的HERZ蛋白表达水平与顺铂的IC50值显著相关。(3) AG825联合顺铂对5种NSCLC细胞系普遍具有显著的协同生长抑制作用，这种协同抑制作用尤其是在使用小剂量顺铂时较明显，并且与细胞系HERZ蛋白表达水平不相关，在这5种NSCLC细胞系中，AG825联合顺铂对H1299、 H460的协同生长抑制作用最强。AG 1 478联合顺铂对H犯2、H358、A549细胞系具有协同生长抑制作用，这种协同抑制作用尤其是在使用小剂量顺铂时较明显，而对H46O、H 1 299没有协同生长抑制作用。(4)AG1478以及AG1478联合顺铂显著抑制H322细胞的生长。AG1478组及AG1478联合顺铂组用药72h以后，中文摘要细胞几乎不再增殖，与对照组及其他用药组相比，差异非常显著。AG 1 478联合顺铂组的细胞增殖率显著低于AG1478组。AG825以及AG825联合顺铂显著抑制H1299细胞的生长。AG825组及AG825联合顺铂组用药96h以后，细胞的增殖率显著低于对照组及其他用药组。AG825联合顺铂组的细胞增殖率显著低于AG825组。(5) AG1478及AG1478联合顺铂使H322的细胞周期阻滞于GO/GI期。对照组及其他用药组无此现象。AG825及AG825联合顺铂使H1299的细胞周期阻滞于S期;对照组及其他用药组无此现象。(6) AG825及AG825联合顺铂导致H 1 299的细胞坏死率显著升高，对照组的细胞坏死率为1%，顺铂组的细胞坏死率为4.0%，AG825组细胞坏死率为36.2%，AG825联合顺铂组细胞坏死率为54.5%。AG1478及AG1478联合顺铂导致H322的细胞坏死率显著升高，对照组的细胞坏死率为1%，AG1478组细胞坏死率为65.2%，AG1478联合顺铂组细胞坏死率为83.2%。(7)AG825、AG1478联合顺铂从用药6h开始直到用药96h，H322细胞系EGFR蛋白表达水平没有变化。AG825、AG1478联合顺乍「J用药96h，H1299细胞系EGFR蛋白表达水平没有变化。(8) AG1478或AG1478联合顺铂使H322细胞系磷酸化ERK蛋白表达水平显著升高。AG1478组从用药 12h开始直到用药96h，磷酸化ERK蛋白表达水平明显升高;AG1478联合顺铂组从用药6h开始直到用药%h，磷酸化ERK蛋白表达水平显著升高。 结论:(1)5种NscLc细胞系HERZ、EGFR蛋白的表达水平不同。5种NSCLC细胞系的H