【摘 要】
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采用RT-PCR扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的全长cDNA片断,并将其克隆到pMD-18T载体中进行测序,序列分析结果表面:ORF7基因cDNA编码区全长372bp,可编码123个氨基酸残基.
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采用RT-PCR扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的全长cDNA片断,并将其克隆到pMD-18T载体中进行测序,序列分析结果表面:ORF7基因cDNA编码区全长372bp,可编码123个氨基酸残基.将该cDNA片断克隆到原核表达载体pGEX-KG的GST编码基因下游,构建了融合表达质粒pKGN.将pKGN转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析表明,pKGN在BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物主要以包涵体形式存在,分子量约42kD;Western blot试验进一步证实该融合蛋白能与猪抗PRRS病毒高免血清发生特异性反应,表明该融合蛋白有良好的反应原性.经8M尿素变性,透析法复性提取包涵体,用所分离纯化的重组蛋白(GST-N)作抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征血清抗体的间接重组蛋白ELISA方法(rN-ELISA).该ELISA方法具有良好的特异性和敏感性.与国外商品化IDEXX HerdCheck ELISA试剂盒平行检测127份血清样品,其总符合率为90.55﹪.
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注定 我注定不能成佛 我坐上金色的莲花 却看不到金光 我正陷入一场世纪之恋 我不能诠释波罗心经 我没有佛法无边 亦不能普度众生 就像我注定不能成为诗人 我的文字歪歪斜斜 透不出一些温暖的句子 我只适合做一个信徒 匍匐在莲花池里装订时光 装订风雨 然后修编成册 学着高僧的样子 虔诚诵读真相 食堂里 可以卤牛肉，卤鸡蛋，卤豆腐 也可以卤猪头、猪耳朵，甚至卤个猪腰子
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