四逆汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用及线粒体机制研究

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目的:四逆汤是汉代张仲景在《伤寒杂病论》中主治少阴虚寒的经典名方,由附子、干姜、甘草组成.具有温中去寒、回阳救逆之功效.近十年来,该课题组对四逆汤的药理学作用及其机制进行深入广泛的探讨,结果发现四逆汤具有清除氧自由基、提高超氧化物歧化酶活性、改变血液粘度、扩张血管、改善能量代谢、抑制细胞凋亡的作用.四逆汤还具有良好的抗心肌缺血再灌注损伤,全面保护心脏的作用.但对四逆汤抗心肌缺血再灌注损伤作用的线粒体-凋亡途径尚不清楚.该研究分为三部分阐明四逆汤抗心肌缺血再灌注的线粒体损伤作用及线粒体介导的凋亡途径.结论:1.四逆汤的三种有效部位附子生物碱、姜辣素、甘草酸,折算人用量附子40克,干姜20克,甘草15克时,为单味药最佳用量.四逆汤三种有效成分组合剂量折合人用药量为附子10g,干姜10g,甘草15g为最佳组合剂量,且与传统水煎剂对缺血心肌保护作用上没有差异.2.四逆汤可以明显减少心肌缺血/再灌注过程中的组织及线粒体氧化损伤,提高组织及线粒体SOD活性,降低组织及线粒体中MDA含量,减轻线粒体的肿胀程度,减少组织中乳酸的形成.从而抗缺血再灌注心肌组织及线粒体的氧化应激损伤,起到心肌保护的作用.3.四逆汤抗心肌缺血再灌注细胞线粒体-凋亡的机制可能是通过提高机体线粒体自身的抗氧化能力,增加线粒体MnSODmRNA的转录的表达,同时通过上调抗凋亡蛋白Bcl-xl蛋白的表达,下调线粒体途径凋亡信号通路Caspase-9的蛋白表达,继而下调Caspase家族最终执行者的Caspase-3蛋白表达而实现.创新点1.探索了四逆汤有效部位单体及组合的最佳剂量.2.动态观察心肌缺血再灌注线粒体的氧化损伤的作用.3.从线粒体介导的凋亡途径阐释四逆汤抗细胞凋亡的作用.
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