Hhcy及B族维生素干预对大鼠脑内ICAM-1和eNOS表达影响的研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mxf542268673
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目的:通过制备大鼠高同型半胱氨酸血症(hyperhonaocysteinemia,Hhcy)模型,探讨Hhcy对大鼠脑内细胞问粘附分子—1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达的影响,及给予叶酸、维生素B12、维生素B6的干预作用。方法:健康4周龄雄性Sprague-Dawley大鼠40只,以随机区组设计法(按体重)分为正常对照组、模型组、干预1组和干预2组四个组,每组10只。正常对照组给予普通饲料饲养和清水灌胃12周;模型组给予高蛋氨酸饲料(1%)饲养和清水灌胃12周;干预1组给予高蛋氨酸饲料饲养和清水灌胃4周,然后继续给予高蛋氨酸饲料和叶酸、维生素B6、维生素B12灌胃8周;干预2组给予高蛋氨酸饲料饲养同时给予叶酸、维生素B6、维生素B12灌胃12周。采用高效液相色谱(high performance liquid chromatogram,HPLC)荧光检测法测定第0周、第4周和第12周各组大鼠血浆总同型半胱氨酸(total Homocysteine,tHcy)水平;通过免疫组织化学法观察ICAM-1、eNOS在大鼠皮层脑血管及脑组织表达情况。结果:1.不同时期各组血浆tHcy水平的变化:正常对照组在第0周、第4周和第12周血浆tHcy水平分别为12.19±2.55μmol/L、11.66±3.74μmol/L、13.27±3.63μmol/L,差别无统计学意义(P>0.05),第0周各组血浆tHcy水平分别为12.19±2.55μmol/L、13.19±10μmol/L、13.37±3.18μmol/L、12.75±3.26μmol/L,差别无统计学意义(P>0.05)。第4周模型组和干预1组血浆tHcy水平(22.85±4.92μmol/L和21.01±6.55μmol/L)均高于正常值(7.10~18.62μmol/L)上限,并显著高于同时期正常对照组(P<0.01),表明Hhcy大鼠模型建成。模型组在第12周血浆tHcy水平(20.76±5.49μmol/L)仍显著高于同时期正常对照组(P<0.01),并且与第4周(22.85±4.92μmol/L)无统计学差异(P>0.05)。第12周,干预1组血浆tHcy水平(10.28±5.05μmol/L)较第4周(21.01±6.55μmol/L)显著下降(P<0.01),且与同时期正常对照组以及第0周时无统计学差异(P>0.05)。干预2组第4周血浆tHcy水平(16.40±4.15μmol/L)高于第0周以及同时期正常对照组(P<0.05),但却低于同时期模型组及干预1组(P<0.05),第12周血浆tHcy水平(10.20±2.25μmol/L)较第4周显著下降(P<0.01),但与同时期正常对照组以及第0周无统计学差异(P>0.05)。2.大鼠脑皮层血管的ICAM-1表达情况:各组ICAM-1阳性血管个数分别为0.35±0.31、3.23±0.88、1.544±0.36、0.984±0.23,其差异均有统计学意义(P<0.05)。高低顺序依次是模型组>干预1组>干预2组>正常对照组。3.大鼠皮层脑组织ICAM-1的表达情况:各组ICAM-1表达的阳性率分别为0.26374±0.0254、0.6056±0.0481、0.44764±0.0338、0.3765±0.0249,其差异均有统计学意义(P<0.01)。高低顺序依次是模型组>干预1组>干预2组>正常对照组。4.大鼠脑皮层血管的eNOS表达情况:各组eNOS阳性血管个数分别为0.43004±0.0320、0.2675±0.0371、0.35134±0.0284、0.41374±0.0145,正常对照组和干预2组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。高低顺序依次是正常对照组、干预2组>干预1组>模型组。结论:Hhcy可以促进大鼠皮层脑血管及脑组织内ICAM-1表达升高,抑制eNOS表达。B族维生素可以有效降低血浆tHcy水平,并且对Hhcy引起的ICAM-1,eNOS表达变化有一定的干预作用。
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