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目的:本课题旨在通过观察温阳化浊方对高龄小鼠子宫内膜容受性及炎性因子水平的影响,研究温阳化浊方对高龄小鼠子宫内膜容受性的改善作用,并进一步探讨炎性因子与子宫内膜容受性的相关性,研究温阳化浊方药提高高龄小鼠子宫内膜容受性的作用机理,为临床应用温阳化浊法增加高龄备孕人群子宫内膜容受性,改善妊娠结局提供科学依据。方法:选取SPF级健康雌性未孕ICR小鼠80只,其中2月龄小鼠20只,9月龄(高龄)小鼠60只。2月龄小鼠作为正常组,9月龄小鼠随机分为空白组、盐水组、中药组,每组20只。2月龄鼠和9月龄空白组不给予干预,9月龄中药组和盐水组分别给予温阳化浊方和生理盐水,灌胃4周。灌胃第三周始,观察小鼠动情周期,于灌胃结束后动情前期合笼,于次日凌晨6点查阴栓,见阴栓为D1,于D5天取材观察各项指标。实验研究分两部分:第一部分,通过观察各组小鼠胚胎着床数量、Western Blot方法检测各组小鼠子宫内膜容受性分子白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor,LIF)、同源框因子10(Homeobox factor 10,HOXA10)的蛋白表达量变化,研究温阳化浊方对高龄小鼠子宫内膜容受性的影响。第二部分:ELISA法检测衰老小鼠外周血清炎性因子核转录因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白介素-1α(Interleukin-1α,IL-1α)的含量变化;RT-PCR法检测子宫组织炎性细胞因子NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β的m RNA相对表达量变化,研究温阳化浊方对高龄小鼠外周血清及子宫组织炎性因子的影响,并将子宫组织炎性因子和小鼠胚胎着床数量、LIF、HOXA10分别行相关性分析,探讨炎性因子和子宫内膜容受性的相关性,研究温阳化浊方改善高龄小鼠子宫内膜容受性的作用机理。结果:1.各组小鼠胚胎着床数量比较与2月龄组小鼠比较,各高龄组的胚胎着床数量下降,差异存在统计学意义(P<0.05)。高龄组间进一步比较,其中空白组和盐水组胚胎着床数量无统计学差异(P>0.05);中药组较空白组、盐水组,小鼠胚胎着床数量增加,但差异均无统计学意义(P>0.05)。2.各组小鼠子宫组织着床分子LIF、HOXA10的蛋白表达量比较与2月龄小鼠比较,高龄小鼠空白组、盐水组子宫组织LIF、HOXA10的蛋白表达量减少,差异具有明显统计学意义(P<0.01)。高龄组间进一步比较,其中空白组和盐水组LIF、HOXA10的蛋白表达无统计学差异(P>0.05);中药组较空白组、盐水组,子宫组织LIF、HOXA10的蛋白表达量升高,差异均存在统计学意义(P<0.05)。3.各组小鼠外周血清炎性因子水平比较与2月龄小鼠比较,高龄小鼠空白组、盐水组外周清炎性因子NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1α的水平升高,差异均存在统计学意义(P<0.05)。高龄组间进一步比较,其中空白组和盐水组无统计学差异(P>0.05);中药组较空白组、盐水组,外周血清炎性因子NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1α的含量均降低,差异存在统计学意义(P<0.05)。4.各组小鼠子宫组织炎性因子m RNA相对表达量比较与2月龄小鼠比较,高龄小鼠空白组、盐水组子宫组织NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β的m RNA相对表达量明显升高,差异具有明显统计学意义(P<0.01)。高龄组间进一步比较,其中空白组和盐水组各炎性因子的m RNA相对表达量均无统计学差异(P>0.05);中药组较空白组、盐水组,炎性因子NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β的m RNA相对表达量均降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。5.子宫组织炎性因子和子宫内膜容受性相关性分析相关性结果显示,子宫组织炎性因子NF-κB、TNF-α、IL-6、IL-1β的m RNA相对表达量和胚胎着床数量、LIF、HOXA10均呈显著负相关,即随着炎性因子m RNA相对表达量增加,胚胎着床数量、LIF和HOXA10的蛋白表达量降低,且差异均具有统计学意义(|Pearson r|>0.7,P<0.05)。结论:温阳化浊方可改善高龄小鼠子宫内膜容受性,降低高龄小鼠外周血清及子宫组织炎性因子水平;并且高龄小鼠子宫组织炎性因子的m RNA相对表达量和子宫内膜容受性具有显著负相关性,推测温阳化浊方可能通过降低高龄小鼠子宫组织的炎症状态,改善高龄小鼠子宫内膜容受性。