检测阴道毛滴虫感染的聚合酶链反应方法的优化和初步评价

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zengdf
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该课题的研究目的是:(1)比较并且筛选PCR检测阴道毛滴虫所用的引物;(2)用阴道拭子标本评价PCR检测阴道毛滴虫的临床意义;(3)对用PCR方法调查女性阴道毛滴虫感染的流行情况进行初步研究.在该课题中,从已发表的文献中筛选了TVA5-TVA6、TV1-TV2、TVK3-TVK73对引物进行比较,每种PCR选择引物、Mg<2+>、dNTPs、Taq酶4个因素,每个因素取3个浓度水平,使用Taguchi法优化,以便得出每种PCR的最佳反应条件.在最佳反应条件下,比较3种PCR的敏感性,选择敏感性最高的引物.此外,用湿片法、培养法和PCR方法检测了106例妇女的阴道毛滴虫感染情况,以培养法作为金标准,对湿片法和PCR方法进行评价.该研究结果初步表明:PCR检测阴道毛滴虫感染敏感而特异,为实验室诊断和流行病学调查提供了新的方法;Taguchi法为PCR反应条件优化提供了省时准确的优化策略,与传统法比较使实验次数明显降低.对阴道毛滴虫感染有必要进行更深入的研究,可以包括:(1)改进PCR反应中的内参照;(2)重视和改进阴道毛滴虫在男性的检测.
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