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Ⅰ群禽腺病毒（Fowl adenovirus group I,FAdV-I）是禽类重要的病原体,分为A、B、C、D和E五个亚群,其中C亚群中的4型腺病毒（FAdV-4）是临床中发病率和死亡率最高的血清型。本研究从临床中分离和鉴定FAdV-4并对其致病性、细胞免疫机制和主要结构蛋白进行分析。第一,分离FAdV-4毒株并鉴定病毒的致病性。采集临床中疑似腺病毒鸡的病变肝脏,接种SPF鸡胚,收集病死鸡胚的尿囊液和肾脏并提取病毒的DNA,用禽腺病毒特异性引物进行PCR扩增,产物进一步进行序列测定和比对分析。结果显示,该分离株为Ⅰ群C亚群4型禽腺病毒,命名为AH-FAdV-4。测定该毒株的TCID50为1′106.52 TCID50/m L。接种15日龄SPF鸡和15日龄番鸭,结果发现接种的SPF鸡在3 d内均死亡且剖检见典型的心包积液病变,而鸭未见死亡,剖检未见典型病变。结果说明本次分离到的AH-FAdV-4为强毒株,对雏鸡的致死率极高但对鸭无明显致病性。第二,对AH-FAdV-4诱发机体的产生干扰素进行研究。分离和培养16日龄SPF鸡胚原代肾细胞,用1 MOI（multiplicity of infection,感染复数）病毒量感染原代肾细胞,5 d后抽提细胞的RNA并进行反转录,应用实时荧光PCR（RT-PCR）方法检测信号通路调控分子（STING和NF-κB）、细胞因子（IFN-β、IFN-γ、IL-1β）、相关膜受体（MDA5、NLRP3）、部分抗原提呈分子（Ii、MHC Ia、MHC IIβ）和信号蛋白（MAVS）基因的表达,结果发现,AH-FAdV-4可以激活STING、NF-κB通路,能提高IFN-β、IFN-γ基因的转录水平,这表明感染后的细胞通过调节SRING和NF-κB信号通路途径促进干扰素的表达,以抵抗病毒入侵;同时,使用抑制剂二硫氨基甲酸肽吡咯烷（PDTC）来抑制NF-κB的活化,发现病毒感染细胞后,抑制NF-κB的表达可以降低抗原递呈分子Ii、MHC Ia、MHC IIβ和NLRP3的表达。这说明病毒通过调控NF-κB,来调控抗原提呈分子的表达进而间接调控T细胞介导的细胞免疫应答。第三,对病毒主要结构蛋白Fiber2进行细胞定位的分析和蛋白的表达。构建含有AH-FAdV-4-Fiber2基因的真核重组质粒pm Cherry-C1-Fiber2、pm Cherry-N1-Fiber2,转染293T细胞利用激光共聚焦显微镜观察其在细胞内定位,结果表明Fiber2主要定位于细胞核。构建Fiber2基因的原核重组表达质粒p ET-32a-Fiber2并进行蛋白的表达和纯化,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定结果表明获得较纯的Fiber2的蛋白,这为AH-FAdV-4亚单位疫苗的制备奠定了基础。