鸡胚肥大细胞的发育研究

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目的本研究拟通过对不同日龄鸡胚胸腺、脾脏、法氏囊、胃、肠、肝脏、肺脏和肾脏肥大细胞(Mast cell,MC)的形态分布及数量变化进行研究,以丰富和完善鸡胚MC发育的相关资料,并探讨MC与鸡胚发育的关系。方法采用Carnoy’s液固定,经甲苯胺蓝(toluidine blue staining,TB)、阿尔新兰染色—藏红O复染(alcian blue-safrianin O,AB/SO)、吖啶橙染色(acridine orangestaining,AO),对不同日龄贵农金黄鸡鸡胚主要器官MC的发育、分布和数量变化进行了观察,并对TB和AB/SO染色效果进行了比较。结果1、采用Carnoy’s液固定,AB/SO和TB都可以使MC着染,前者显示的MC较多。两者均可较好显示MC颗粒。TB染色组织的背景较浅,组织结构较模糊,AB/SO染色可以清晰地显示组织结构,表明AB/SO和TB均是鸡胚MC优良的染液,AB/SO能更好地显示鸡胚MC。2、经AB/SO染色,MC呈圆形、椭圆形和不规则形,大小不一。鸡胚各器官MC分布如下:胸腺MC主要分布在髓质。在淋巴小结出现前,法氏囊MC在皱襞上靠近黏膜上皮分布,淋巴小结形成后,主要分布于淋巴小结周围结缔组织,淋巴小结边缘偶见。脾脏中MC分布在实质,血窦、血管中偶见。胃黏膜层和黏膜下层MC较多,在腺胃黏膜上皮和复管腺之间分布较多,随着胃底腺的出现,MC在胃底腺周围分布密集。肠道黏膜层和黏膜下层见有MC分布。MC在肝实质以及血管周围多见,血窦内和中央静脉中偶见。肺脏小支气管黏膜固有层、肺房、呼吸毛细管、三级支气管间结缔组织尤其是血管周围均有MC分布。肾脏中肾小球周围MC较多,肾间质和中央静脉中也发现MC。3、经AB/SO染色,发现各主要器官MC的数量随孵化日龄的增加而增加,在18日龄左右达到最大值,之后有所下降,21日龄又有所增加。4、经AB/SO染色,同日龄相比,免疫器官分布的MC最多,消化器官较多,肺较少,肾脏最少。免疫器官相比,19~21日龄胸腺MC数量极显著多于法氏囊和脾脏(P<0.01);胃MC数量极显著多于肠和肝脏(P<0.01)。5、经吖啶橙染色,在14日龄鸡胚胸腺、法氏囊、脾脏中,15日龄胃,16日龄肺,17日龄肠,19日龄肝脏和肾脏中均出现吖啶橙荧光阳性细胞。结论1、Carnoy’s液是鸡胚MC优良的固定液,AB/SO比TB能更好地显示鸡胚MC;2、在不同日龄鸡胚发育过程中,10~12日龄未发现MC,于13日龄鸡胚胸腺中最早发现MC;3、MC的数量和器官的发育呈正相关;4、MC在免疫器官中数量最多,消化器官较多,肺较少,肾脏中MC最少;5、在鸡胚胸腺、法氏囊和脾脏实质中,14日龄发现吖啶橙荧光阳性细胞。
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