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研究目的和意义:本研究分析比较急性期和缓解期NMOSD患者与正常对照组外周血单个核细胞中CD19+CD24hiCD38hi Tr B细胞不同分型的表达,探讨Tr B细胞产生IL-6和IL-10的能力,而且比较了NMOSD急性期和缓解期中血清和脑脊液(CSF)中IL-40的表达水平,进一步更好地了解Tr B细胞参与NMOSD发病机制以及为寻求新的治疗靶点提供思路和方向。研究方法:应用流式细胞仪检测急性期和缓解期NMOSD患者与正常对照组CD19+CD24hiCD38hi Tr B细胞及其不同分型的表达(T1 B:CD24hiCD38hiCD27-Ig MhiIg Dlo;T2 B:CD24hiCD38hiCD27-Ig MinIg Din;T3 B:CD24hiCD38hiCD27-Ig MloIg Dlo;CD27+Tr B:CD24hiCD38hiCD27+),进一步检测Tr B细胞及其不同亚型产生IL-6和IL-10的水平;用ELISA技术检测NMOSD急性期和缓解期中血清和脑脊液(CSF)中IL-40的表达水平。研究结果:(1)NMOSD急性期患者外周循环中的Tr B细胞(CD19+CD24hi CD38hi)在CD19+B细胞中所占的百分比和数目,与NMOSD缓解期患者和HC组相比明显减少。而NMOSD急性期患者外周循环中的成熟B细胞(CD19+CD24+CD38+)的数目和记忆B细胞(CD19+CD24hi CD38+)的比例与HC组相比明显增加。NMOSD急性期患者外周循环中T1 B细胞在Tr B细胞中所占的百分比,与NMOSD缓解期患者相比明显增加。外周循环中T2 B细胞在Tr B细胞中所占的百分比,NMOSD急性期和缓解期患者以及HC组相比没有明显差异。NMOSD急性期患者外周循环中T3 B细胞所占百分比,与HC组相比明显减少。外周循环中CD27+Tr B细胞所占百分比,NMOSD急性期患者与HC组和NMOSD缓解期患者相比明显减少。(2)NMOSD急性期患者外周循环中IL-10+B细胞在CD19+B细胞中所占的百分比,与HC组和NMOSD缓解期患者相比明显减少。外周循环中IL-10+B细胞在Tr B细胞中的百分比,NMOSD急性期患者与HC组和NMOSD缓解期患者相比也是明显减少。NMOSD急性期患者外周循环中IL-10+B细胞在T1 B、T2 B和CD27+Tr B细胞中所占的百分比,与HC组和NMOSD缓解期患者相比都明显减少。然而外周循环中的IL-10+B细胞在T3 B细胞中所占的百分比,NMOSD急性期和缓解期患者与HC组相比明显减少。(3)NMOSD急性期患者外周循环中IL-6+B细胞在CD19+B细胞中所占的百分比,与HC组和NMOSD缓解期患者相比明显增加。外周循环中IL-6+B细胞在Tr B细胞中所占的百分比,NMOSD急性期患者与HC组和NMOSD缓解期患者相比明显增加。NMOSD急性期患者外周循环中IL-6+B细胞在T1 B、T2 B和T3 B细胞中所占的百分比,与HC组和NMOSD缓解期患者相比都明显增加。而外周循环中的IL-6+B细胞在CD27+Tr B细胞中所占的百分比,NMOSD缓解期患者与HC组相比明显减少。(4)NMOSD缓解期患者血浆中IL-40的水平,与HC组和NMOSD急性期患者相比明显增高,但是急性期患者和HC组相比无明显差异,而CSF中IL-40的水平,NMOSD急性期患者与HC组相比无明显差异。NMOSD患者外周循环中的Tr B细胞的百分比和血浆IL-40水平之间存在正相关。(5)血清AQP4-Ig G阳性的NMOSD患者外周循环中的Tr B细胞的百分比,与血清AQP4-Ig G阴性的NMOSD患者相比明显减少。在Tr B细胞不同亚型中,只有CD27+Tr B细胞在血清AQP4-Ig G阳性的NMOSD患者外周循环中的百分比是明显低于血清AQP4-Ig G阴性的NMOSD患者,而T1 B、T2 B和T3 B细胞在血清AQP4-Ig G阳性的NMOSD患者外周循环中的百分比和血清AQP4-Ig G阴性的NMOSD患者无明显差异。(6)NMOSD急性期患者外周循环中的Tr B细胞的百分比和EDSS之间无明显相关性,而与ARR之间存在负相关。结论:(1)NMOSD急性期患者和HC组相比Tr B细胞的比例降低,以及急性期患者的Tr B细胞中IL-10的表达减少和IL-6的表达增加,而缓解期患者中Tr B细胞的比例及其表达IL-10的水平与HC组相比无明显差异,但是表达IL-6的水平却明显降低。这表明Tr B细胞可能参与NMOSD的发病机制,而且急性期Tr B细胞不能维持抗炎因子和促炎因子之间的平衡,免疫调节功能受到损害,但缓解期Tr B细胞的免疫调节功能可能逐渐恢复。(2)NMOSD患者外周血中Tr B细胞比例和ARR呈负相关,而且AQP4-Ig G阳性的患者中Tr B细胞的比例更低,这表明Tr B细胞有可能成为监测疾病复发的指标之一。(3)NMOSD急性期患者中T3 B细胞和CD27+Tr B细胞的比例都明显降低,以及血清AQP4-Ig G阳性的NMOSD患者中CD27+Tr B细胞的比例也是明显低于血清AQP4-Ig G阴性的NMOSD患者,而且NMOSD缓解期患者外周循环中的IL-6+B细胞在CD27+Tr B细胞中所占的百分比也明显减少。这表明相比其它Tr B细胞亚群,CD27+Tr B细胞可能在免疫调节功能中起到主要作用。(4)NMOSD缓解期患者外周循环中IL-40的表达水平高于急性期患者和HC组,并且NMOSD患者中Tr B细胞的比例和IL-40的表达水平呈正相关,这表明IL-40可能和Tr B细胞的发育过程有关。