苏云金芽胞杆菌aiiA基因转化石斛兰的研究

来源 :中山大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shujun2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
石斛兰(Dendrobium)是国际花卉市场上最受欢迎的兰花切花和盆花品种之一,但其易受细菌性软腐病侵染,令生产者蒙受巨大损失。苏云金芽胞杆菌(Bacillusthuringiensis,Bt)的aiiA基因编码的AiiA蛋白能降解N-乙酰高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs),可以明显抑制马铃薯软腐病的发生。使用转基因技术导入外源抗病基因是目前兰花抗病育种的新方向,但目前的兰花遗传转化系统还不成熟。本论文以石斛兰大熊猫1号(D.Ekapol‘PANDA No.1’)为材料,应用农杆菌介导的方法将Bt的aiiA基因转入石斛兰,并对转化条件进行了优化,以研究研的AiiA蛋白对防治石斛兰软腐病的影响,并提高石斛兰的转化效率。 本研究通过PCR方法从Bt中克隆了aiiA基因,在双元转化载体pCAMBIA1301(含有潮霉素选择标记基因)基础上构建了分别受花椰菜花叶病毒35S(CauliflowerMosaic’Virus 35S promoter,CaMV 35S)启动子和玉米泛素启动子(maize ubiquitinpromoter)控制的表达载体pSAN和pUAN,以期比较这两种启动子在转基因石斛兰中的表达效果。 将pSAN和pUAN分别导入农杆菌LBA4404或EHA105,获得了4种工程菌,并比较了它们转化石斛兰的效率。GUS瞬时表达结果表明,带有pSAN或pUAN的EHA105均能比带有pSAN或pUAN的LBA4404更有效地转化石斛兰。 使用含有pSAN和pUAN的EHA105转化石斛兰,经过了4个月的选择培养,已获得一批潮霉素抗性的石斛苗。对部分抗性苗的叶片进行了GUS染色,结果表明该基因已稳定表达。用含有pUAN的EHA105转化石斛兰,研究了不同菌液浓度(OD<,600>)、侵染液添加或不添加乙酰丁香酮(acetosyringone,AS)对转化效率的影响。GUS瞬时表达结果表明,只有当农杆菌生长至OD<,600>值为0.8时,添加AS能略为提高转化效率,而在OD<,600>值分别为0.6、1.0和1.2时,添加AS均会不同程度降低转化效率。在各种处理中,OD<,600>为1.0时不添加AS的转化效率最高,达44.4﹪。
其他文献
本文对人参年龄的鉴定进行了研究。主要内容如下: 1)用高效液相色谱法(HPLC)对不同年龄人参的甲基化水平进行研究,结果表明人参的甲基化水平不仅受到生长年龄的影响,也受到生
干旱是严重影响植物生长发育的重要环境胁迫因子之一,植物的抗旱性反应是一个涉及到众多基因,受多途径调控的复杂过程,并且不同的植物对胁迫的反应和适应也是复杂的和高度可变的
东方艺术·大家:您在北京这边搬过几次工作室?刘芯涛:两次。费家村和一号地旁边的318艺术园区。之前一直在成都。东方艺术·大家:是什么原因促使您来北京的呢?刘芯涛:当时有
香蕉属芭蕉科(Musaceae)、芭蕉属(Musa),是热带、亚热带地区重要的食品作物之一,具有很高的经济价值。但是近年来由于香蕉病害逐年严重,寒害、旱害时常发生,使得香蕉生产遭受严重
摘要:钟启泉教授认为“有效教学”的最终衡量标准就是“学生成长”。自实行新课改以来,学校把“为学生成功幸福的人生奠基”作为基本的教育理念,提出了“英才无差生,生生都灿烂”的育人口号。我们在各班也成立了学生成长共同体,对学生不抛弃、不放弃。  关键词:初中;化学;习题;高效  中图分类号:G633.8 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2017)09-0039  建设高效课堂是较为突出的一
周围神经损伤常引起病理性疼痛,表现为顽固性的痛觉过敏,包括痛超敏(痛阈显著下降)、痛敏(痛反应增强)和自发性疼痛。多年来,尽管国内外已经进行了大量研究,但病理性疼痛的机制仍
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
摘要:提问是英语课堂的重要教学手段之一,设计有效的问题能把学生带入一个奇妙的问题世界,点燃学生思维的火花、激发学生的求知欲望,培养和训练学生创新思维的能力,有效地提高初中英语课堂教学效果。本文从现阶段英语教师的课堂提问入手,探索初中英语教学中有效课堂提问的策略,促进学生创新思维能力的培养,从而提高教师的课堂教学效果。  關键词:英语课堂;有效提问;策略  中图分类号:G632.0 文献标识码:A
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
摘要:随着社会的发展和课程改革的推进,初中数学课程的重要性日趋凸显,社会对青少年的数学素质和自学能力有越来越高的要求,初中数学教学的高效性已经成为当前农村初中教育的根本要求。但是由于农村初中数学教学改革的进程中还存在许多障碍,例如:教学资源较少,生源基础薄弱,教师教学理念严重滞后等,需要数学教师共同努力,从全方位出发,不断提高数学课堂教学的有效性,打造数学高效课堂。本文将结合教学实践和理论知识就提