银纳米粒子和光散射技术在生物大分子及药物分析中的应用

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本文的第一部分研究银纳米-稀土铽(Ⅲ)离子-核酸体系的共振光散射光谱,用普通的荧光分光光度计建立了一种新型的核酸定量测定方法。实验发现,一定粒径和一定浓度范围内的银纳米粒子可以大大提高体系测定的灵敏度。对于小牛胸腺DNA(ctDNA),鱼精DNA(fsDNA)和酵母RNA(yRNA)线性范围分别为:7.0×10-9~8.0×10-6gmL-1,2.0×10-8~1.0×10-6gmL-1,1.0×10-9~1.0×10-7gmL-1。其检出限分别为1.4ngmL-1,1.2ngmL-1和0.85ngmL-1。并对其共振光散射光谱,荧光光谱,紫外吸收光谱等进行了讨论。该方法成功的用于合成样品(DNA)和实际样品(RNA)的测定,获得令人满意的结果。 本文的第二部分研究稀土铽(Ⅲ)离子-表面活性剂(SDS)-血清蛋白体系的二级散射光谱,基于此,建立了定量测定蛋白的新方法。在体系中以稀土铽(Ⅲ)离子为探针,并加入一定量的SDS表面活性剂,实验发现,体系的二级散射光强度与血清蛋白的浓度在一定范围内呈线性关系,应用此方法分别测定了人血清白蛋白和丙种球蛋白,其线性范围:对于人血清白蛋白是7.0×10-9~1.0×10-5gmL-1,对于丙种球蛋白是5.0×10-9~5.0×10-6gmL-1,检出限分别为4.4ngmL-1和3.1ngmL-1,并应用于实际的人血清蛋白的测定分析中,与传统的考马斯亮蓝方法比较,取得较理想的结果。同时对其机理进行了简单的分析和探讨。 本文的第三部分研究银纳米-稀土铽(Ⅲ)离子-甲磺酸培氟沙星体系的二级散射和荧光光谱。我们发现,一定浓度和颗粒大小的银纳米粒子能有效的增强铽(Ⅲ)-甲磺酸培氟沙星配合物545nm处的二级散射光的强度,同时对铽(Ⅲ)与甲磺酸培氟沙星配合物中分子间的能量传递有促进作用,而且545nm处的相对发光强度与甲磺酸培氟沙星的浓度在一定的范围内呈线性关系,从而建立了银纳米粒子敏化荧光和二级散射光谱法测定甲磺酸培氟沙星的新方法,并与氧氟沙星做了比较。在最佳实验条件下,此方法的线性范围为8.0×10-9~8.0×10-6molL-1,检出限为2.5×10-9molL-1。利用该方法对甲磺酸培氟沙星胶囊和血清中的甲磺酸培氟沙星进行直接测定,结果令人满意。
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