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本研究旨在探讨将重组高密度脂蛋白(rHDL)应用于化疗药物向肿瘤递送及克服肿瘤耐药的可能性,并探讨细胞自噬在肿瘤耐药中的作用。在论文第一部分,使用硫酸铵梯度法制备重组高密度脂蛋白-阿霉素复合物(rHDL/Dox),用共聚焦显微镜和流式细胞仪观察肝癌细胞对rHDL/Dox的摄取,用MTT, western blot等方法评价rHDL/Dox对肝癌细胞的杀伤,用小动物活体成像实验来探讨rHDL在小鼠体内的肝靶向性。第论文二部分,用real time PCR、流式分析和IC50测定等方法证明KBV细胞的耐药性,用MTT、western blot、细胞凋亡检测以及Tunel染色等方法观察rHDL/Dox克服肿瘤耐药的效果。第三部分用western blo、Cyto-ID染色、EGFP-LC3转染和电镜观察的方法证明rHDL/Dox诱导KBV细胞细胞自噬的发生,通过联用细胞自噬抑制剂和使用RNA干扰技术证明细胞自噬在肿瘤耐药中的作用。rHDL/Dox具有均匀的粒径分布(-63nm)及显著的缓释功能；共聚焦观察和流式分析表明,通过SR-B1受体的介导作用rHDL/Dox可以在肝癌细胞内积聚能多的阿霉素药物;Western blot和LDH活性测定表明rHDL/Dox引起HepG2细胞和SMMC-7721细胞更强的caspase-3依赖性的凋亡和乳酸脱氢酶LDH的释放(930U/L,836U/L)；活体成像观察表明rHDL在小鼠体内具有较好的肝靶向性。Western blot实验结果表明耐阿霉素细胞株KBV可较高水平表达SR-B1受体；与游离阿霉素和脂质体阿霉素相比,rHDL/Dox可更好的克服P-糖蛋白(P-gp)对阿霉素的外排作用,在细胞内积聚更多的阿霉素药物,引起更强烈的caspase-3依赖的细胞凋亡,和核内DNA的断裂。本研究还进一步表明在rHDL/Dox处理KBV细胞时伴随着细胞自噬的发生,细胞自噬增强了KBV细胞对阿霉素的耐受和抵抗；联用细胞自噬抑制剂氯喹和LY294002后,rHDL/Dox可更好地逆转肿瘤耐药,引起更强的细胞凋亡；基因敲除自噬相关基因Atg5或Beclini后,可以削弱KBV细胞对rHDL/Dox的耐受；rHDL/Dox引起的细胞自噬受Akt/mTOR通路调控。综上所述,rHDL/Dox可增强阿霉素对肝癌细胞的杀伤效果,通过克服耐药肿瘤细胞的药物外排作用来克服肿瘤耐药,抑制细胞自噬增强rHDL/Dox克服肿瘤耐药的效果。