白牦牛繁殖季节卵巢中褪黑素受体MT1和MT2的分布及其基因表达研究

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褪黑素是一种神经内分泌激素,对哺乳动物的生殖生理有调控作用,而这种作用是由褪黑素受体MT1和MT2介导的。褪黑素可直接作用于卵巢上分布的褪黑素受体,调控卵巢卵泡的发育。白牦牛是生活在高寒缺氧严峻自然条件下的稀有牦牛品种,褪黑素受体在白牦牛卵巢中的分布特征,褪黑素受体基因在白牦牛卵巢内的表达模式以及褪黑素调控白牦牛卵巢的生殖机理至今我们还尚未弄清。所以,此研究选择了雌性的白牦牛为研究对象,运用分子生物学、免疫组化、荧光定量的方法,对白牦牛卵巢中褪黑素受体分布和表达做了初步的研究,其结果是如下:1.分子特征成功克隆了白牦牛卵巢褪黑素受体MT1(843bp)和MT2(411bp)基因序列,同源比对发现白牦牛和水牛的MT1基因序列最接近为95.6%;MT2基因序列与黄牛的最相似,预测和比对分析了白牦牛褪黑素受体基因所编码的蛋白肽段,发现了白牦牛MT1和MT2受体蛋白均属于G蛋白偶联受体家族,且白牦牛的MT1和MT2基因均未见有人报道过。2.受体分布免疫组织化学的结果显示,MT1和MT2受体在白牦牛的卵巢中表达位置及表达量存在差异性,其表达量均较高,说明褪黑素在调节卵巢发挥生理作用过程中,MT1和MT2既有协同性作用,也有独立的调节功能。3.组织间的表达差异性运用了实时荧光定量的方法,研究了妊娠期白牦牛卵巢和黄体组织中的MT1和MT2mRNA的表达差异性,黄体中的MT1和MT2mRNA的表达均高于卵巢,且黄体MT1mRNA的表达显著高于卵巢,而MT2差异不显著。论文首次报道了克隆的白牦牛MT1和MT2部分基因序列,对妊娠期白牦牛卵巢中受体基因的表达和分布特征进行了探索,这为褪黑素对其他哺乳动物的调节生殖生理的作用机制提供了一定的理论依据。
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