生物复合微球的制备及固定化脂肪酶的研究

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从上世纪六十年代以来,酶的固定化技术发展十分迅速,其中固定化酶载体的研究已成为固定化技术研究中的重要内容。固定化酶的性能主要取决于固定化酶所使用的载体材料的性质和固定化方法。本论文主要从载体的制备、固定化酶的方法、性质及应用几个方面介绍了载体和固定化酶的发展现状,由此制备了两种固定化酶载体,并将其用于脂肪酶的固定化研究。此种载体固定化脂肪酶在制备生物柴油等方面有一定的应用前景。本论文的主要内容有以下几个方面:1.以酪蛋白和壳聚糖两种天然高分子材料为原料,采用反相乳液法制备了复合高分子微球,并通过扫描电子显微镜、热分析仪、红外光谱仪等对其相关性能进行研究。实验结果表明所制得的微球粒径均一,分散性良好、能耐受一定浓度的酸碱溶液且有一定耐热性。2.采用化学共沉淀法,制备了粒径约为18 nm,比饱和磁化强度为69.0 emu/g Fe3O4,具有超顺磁性的Fe3O4纳米粒子。3.以酪蛋白和壳聚糖为原料,加入Fe3O4纳米颗粒,通过反相乳液法制备了具有磁响应性的磁性复合高分子微球。并通过扫描电子显微镜、热分析仪、红外光谱仪、X射线粉末衍射仪、振动样品磁强计等对其相关性能进行了研究。实验结果表明所制得的磁性微球粒径均一,分散性和耐热性良好。该磁性微球的比饱和磁化强度达到24.5 emu/g微球,无剩磁和矫顽力,有优越的磁响应性,能快速从溶液中分离。4.以酪蛋白复合微球为载体,用物理吸附法制备固定化脂肪酶,对固定化过程中对酶活力有影响的各种因素做了研究,考察了固定化酶的热稳定性和重复使用性。结果表明:固定化酶的活力回收率为53%,固定化酶的最佳pH值为7.5,最佳温度为40℃。与游离酶相比,固定化脂肪酶具有良好的热稳定性、可应用性和重复使用性。5.以磁性酪蛋白复合微球为载体,用物理吸附法制备固定化脂肪酶,对固定化过程中对酶活力有影响的各种因素做了研究,考察了固定化酶的热稳定性和重复使用性。结果表明:固定化酶的活力回收率为57%,固定化酶的最佳pH值为8.0,最佳温度为50℃。与游离酶相比,固定化脂肪酶具有良好的热稳定性、可应用性和重复使用性,同时实现了酶的快速分离回收。
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