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目的观察火针针刺犊鼻、内膝眼两穴对兔膝骨性关节炎模型血清中MMP-3、MMP-13及关节软骨中β-catenin表达的影响,以此初步探讨火针治疗KOA的疗效和作用机理,以及Wnt/β-catenin信号通路与其下游相关因子MMP-3、MMP-13之间的关系。方法40只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、毫针对照组和火针治疗组,每组10只。除空白组外,其余3组均运用Videman法建立兔KOA模型。造模成功后,毫针对照组每日予常规毫针针刺犊鼻、内膝眼、梁丘、血海治疗,火针治疗组隔1日予火针刺激犊鼻、内膝眼治疗,空白组和模型组不干预。治疗2周后,用酶联免疫法检测血清中MMP-3、MMP-13的浓度,处死实验兔,观察右膝关节软骨情况,切取膝关节软骨做标本,用于HE染色和免疫组化检测软骨中β-catenin的浓度。实验数据使用IBM SPSS Statistics 22.0和Graph Pad Prism 6.0进行统计分析。结果1.观察膝关节情况:(1)空白组兔膝关节正常,无肿胀、粘连,软骨光滑明亮完整。(2)模型组兔膝关节肿胀明显、多处粘连,软骨粗糙无光泽,部分软骨变薄,严重者有明显缺损和裂隙。(3)毫针对照组和火针治疗组,两组之间肉眼观察无明显差异,但情况均优于模型组,膝关节肿胀及粘连者较少,软骨呈浅白色,表面完整程度明显较模型组好,关节边缘较整齐。2.关节软骨HE染色结果及光镜下Mankin’s评分:(1)空白组软骨细胞排列均匀,形态呈正常的圆形,细胞核染色均匀,基质无失染。(2)模型组软骨细胞数目明显减少、排列紊乱、分布不均,可见细胞成簇出现,软骨细胞固缩坏死严重,空泡多。(3)毫针对照组和火针治疗组软骨细胞分布较模型组均匀、排列尚整齐,偶可见细胞成簇出现,软骨细胞基本正常,偶有软骨细胞固缩坏死或空泡,整体情况较模型组好。(4)Mankin’s评分显示模型组评分较空白组显著升高(P<0.01),毫针对照组、火针治疗组评分较空白组高(P<0.01),但显著低于模型组(P<0.01),毫针对照组和火针治疗组相较差异无统计学意义(P>0.05)。3.血清中MMP-3、MMP-13的浓度:模型组浓度较空白组显著升高(P<0.01),毫针对照组、火针治疗组浓度较空白组高(P<0.01),但显著低于模型组(P<0.01),火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义(P>0.05)。4.关节软骨中β-catenin的表达情况:模型组阳性表达率较空白组显著升高(P<0.01),毫针对照组、火针治疗组阳性表达率较空白组高(P<0.05),但显著低于模型组(P<0.01),火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论1.火针针刺治疗膝骨性关节炎效果明确,相较于毫针治疗火针治疗取穴少、治疗次数少,在患者的依存性和连续治疗性上相对更有优势,这也为火针治疗KOA的临床运用提供了依据。2.火针治疗可以降低血清中MMP-3、MMP-13的浓度且降低软骨中β-catenin的表达,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,减少其下游MMP-3、MMP-13的表达,从而解缓膝关节退行性病变的进程。