论文部分内容阅读
目的:研究不同浓度Biodentine对人骨肉瘤细胞MG-63增殖及成骨作用的影响。方法:将表面积S=75mm2的圆柱形研究材料置于1.5ml培养液中浸提24小时后,过滤除菌得到浓度为50 mm2/ml的Biodentine浸提液(即浓度比例记作1),1:1连续稀释四次,得到五个浓度梯度的稀释液即:1、1/2、1/4、1/8和1/16。不同浓度的Biodentine分别作用于MG-63细胞,用CCK-8法分别于第1、3、5、7天检测细胞增殖情况。依据细胞增殖实验结果,选取1/16浓度Biodentine作用于MG-63细胞,于第1、3、5、7天,用Real-time PCR法检测MG-63细胞中成骨因子Runx2 mRNA表达情况;并于第10天和第14天行茜素红染色,观察MG-63细胞钙化结节形成情况。结果:1.各时间点不同浓度Biodentine(BD)对MG-63细胞增殖的影响(1)Biodentine作用于MG-63细胞第1天,活细胞数量与空白对照组比,1浓度组、1/2浓度组、1/8浓度组略有下降,1/4浓度组无明显变化,1/16浓度组增多。各组间活细胞数的差异无统计学意义(p>0.05)。(2)biodentine作用于mg-63细胞第3天,活细胞数量与空白对照组比,1浓度组略有下降,1/2浓度组,1/4浓度组和1/8浓度组无明显变化,1/16浓度组略有增多。各组间活细胞数的差异无统计学意义(p>0.05)。(3)biodentine作用于mg-63细胞第5天,活细胞数量与空白对照组比,1浓度组明显降低,差异有统计学意义(p<0.05);1/2浓度组略降低,差异无统计学意义(p>0.05);1/4浓度组、1/8浓度组略有升高,差异无统计学意义(p>0.05);1/16浓度组明显升高,差异有统计学意义(p<0.05)。(4)biodentine作用于mg-63细胞第7天,活细胞数量与空白对照组比,1浓度组、1/2浓度组明显降低,差异有统计学意义(p<0.05);1/4浓度组、1/8浓度组略降低,差异有统计学意义(p<0.05);1/16浓度组略有上升,差异无统计学意义(p>0.05)。2.biodentine对mg-63细胞成骨性的影响(1)runx2mrna的表达1/16浓度bd作用于mg-63细胞第1天时,mg-63细胞runx2mrna的表达量为空白对照组的1.14倍,差异有统计学意义(p<0.05);第3天时,runx2mrna的表达量为空白对照组的5.29倍,差异有统计学意义(p<0.05);第5天时,runx2mrna的表达量为空白对照组的1.08倍,差异有统计学意义(p<0.05);第7天时,runx2mrna的表达量为空白对照组的2.11倍,差异有统计学意义(p<0.05)。(2)不同处理组的茜素红染色1/16浓度bd作用于mg-63细胞第10天时,与空白对照组相比,肉眼均未见矿化结节,镜下观察均可见2~3处小面积红色钙化物,两组之间未见显著差异。1/16浓度bd作用于mg-63细胞第14天时,空白对照组可见6孔板内大面积红色钙化物;1/16浓度bd组见红色钙化物,面积比对照组更广泛,颜色更深。1.不同浓度的Biodentine对MG-63细胞增殖的作用不同,50 mm2/ml的Biodentine可抑制细胞增殖,低于该浓度的浸提液无明显的抑制细胞增殖作用。2.Biodentine能够使MG-63细胞Runx2 mRNA表达升高,可加强MG-63细胞的成骨作用。