本研究以临床收集的非综合征遗传性聋家系为材料，采用基因定位技 术和连锁分析方法，探讨所选择的非综合征遗传性聋家系的致病基因与已 报道的非综合征遗传性聋相关基因位点的连锁关系。本研究分为三部分： 一、非综合征遗传性聋家系调查、表型鉴定和连锁分析能力评估 目的：确定所收集家系的遗传模式、表型特征、评估连锁分析能力， 为下一部分的基因定位研究奠定基础。方法：收集非综合征遗传性聋家系21 个，采用问卷调查方式，进行全身体检、听力学测试(纯音测听、声阻抗 检查及听性脑干反应),应用形式遗传学分析和分离分析，确定家系的遗传 方式。采用SIMLINK软件进行连锁分析的模拟计算，评估连锁分析能力。 结果：(1)形式遗传学分析：在21个家系中，常染色体显性遗传11个家系， 常染色体隐性遗传 7个家系，母系遗传 3个家系；(2)表型鉴定：确认 21 个家系均为非综合征遗传性聋，归纳了患者的病因、发病年龄、听力损失 程度和进展情况等表型特征；(3)家系3的系谱分析和表型鉴定：该家系的 家庭成员共4代53人，其中耳聋患者19人(男性9人，女性10人),为 典型的常染色体显性遗传，病史调查和体检排除了综合征遗传性聋和其它 原因导致耳聋的可能，听力学测试表明耳聋患者均为感音神经性聋，为蜗 性听力损害。听力曲线以下降型为主，发病年龄在20岁左右，20～29岁进 展明显，而30～49岁则无明显进展，50岁以后听力减退速度加剧；在16位 患者中，有 7位表现左右耳听力损失不对称，5人只表现单侧耳聋；(4)家 系3遗传连锁分析能力的模拟计算结果表明，如果该家系的致病基因与所 分析的STR标记存在连锁，可在θ=0.000时，获得Lods最大值为3.781。 结论:所收集的21个家系为非综合征遗传性聋，家系3为非综合征显性遗摘 要 非综合征常染色体显性遗传性聋家系的基因定位研究传性聋，具有明显的表型特征，如进行连锁分析，LodS值可以＞3，因此，可选择家系3作为基因定位研究的材料。 二、非铂征显性雕腔相拢因瞰的STR ＄因型分析 目的：选择具有与家系3相似表型的已报道耳聋相关基因座作为候选基因位点，进行STR基因型分析。方洁：家系3接受调查者35名及正常汉人50名，抽取静脉血，常规方法提取DNA。以聚合酶链反应（PCR）扩增22个候选基因位点（DFNAI、DFNAZ、DFNA3、DFNA4、D贝小u、DFNA6、DFNA、DFNAS、DFNAg、DFNA10、DFNAll、DFNA12、DFNA13、DFNA15、DFNA历、＊D队17、DFNAZ 0、＊FNAZ 5、DFNAZ 6、＊FNAZ 8、＊FNA3 0、DFNA3 7）的STR标记；对正常汉人扩增m个候选基因位点的STR标记。扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后，进行变性聚丙烯酚胺凝胶电泳，采用银染法显示STR的等位片段，记录各家系成员和正常人的基因型。采用PPAP软件计算正常人各STR位点等位片段频率、基因型频率、预期基因型频率、多态信息量oIC）和H咖冲Wenny平衡吻合性检验。结果：＊）中国汉族正常人 D65287、DSSll32、D1351275、D15S130、DIS2726、D453038、D252380、D225282。D1451042、D75529各位点分别检出10个、9个、8个、7个、7个、7个、6个、6个、6个及5个等位片段，多态性分布均符合Hmpweinny 平衡定律。各位点PIC值分别为0．879、0．854、0．864、0．821、0．686、0．794、0．764、0．732、0．773、0．712；（）对家系成员35人22个候选位点STR的基因型分析，结果表明，正常听力者与耳聋患者的等位片段分布无明显差异。结论：中国汉族人群D65287、D851132、D1351275、D二5513O、DI幻726、＊483038、DZ眨38o、＊22眨82、D14S二042、＊7“29等10个位点STR均具有较高的杂合度和多态信息量，是较理想的遗传标记，这对连锁分析、基因诊断等都有很重要意义。对家系成员22个候选位点STR 二 【且 摘 要 非综合征常染色体显性邀传性聋家系的基因定位研究 — — 的基因型分析可用于连锁分析。 三、非综合征显性遗传性聋相关基因位点鲍撕 目的：对候选的22个耳聋相关基因位点进行连锁分析，以确定家系3 的致病基因与 22个基因位点的连锁关系。方法：采用 GE ho 5．2） 软件包的MLe程序进行连锁分析，比较不同发病率和不同人种等位片段 频率的Lods计算结果；计算家系3致病基因与22个基因位点的ods值。 结果：（）发病率及等位片段频率不同，并没有从本质上影响Lods值的计 算结果；（）家系3的连锁?