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目前，酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测畜禽血清抗体最常用的方法之一，在此基础上又发展了免疫胶体金试纸条技术，使检测时间从2～3小时缩短至5～10分钟左右，我们发现，试纸条技术所使用的第二抗体必须用单克隆抗体才能消除无关的非特异性反应，在完成鸡血清抗体检测免疫胶体金试纸条的基础上，本研究拟用鸭IgY免疫小鼠，筛选出抗鸭IgY C3/C4段单克隆抗体，以用于ELISA方法和胶体金试纸条方法检测鸭血清抗体水平。经初步应用结果显示，用鸭IgY C3/C4单克隆抗体建立的ELISA方法可检测鸭疫里默氏杆菌抗体水平，且具有很高的特异性和灵敏度。本研究的方法及结果如下： 1.抗鸭IgY C3/C4段单克隆抗体的研制利用纯化的鸭IgY免疫Balb/c小鼠，制备免疫脾细胞，通过常规的细胞融合技术与SP2/0骨髓瘤细胞融合；分别用鸭IgY、IgY(△Fc)作为捕获抗原进行双向负筛选，所得的阳性杂交瘤细胞株，采用有限稀释法进行了克隆，得到一株高效价的单克隆杂交瘤细胞系，命名为MAD-4F4。其腹水效价达1：64000；本株单抗为IgG1亚类，染色体数目为82～92之间。 2.鸭疫里默氏杆菌抗体ELISA方法建立本实验用鸭IgY C3/C4段单克隆抗体和表达的鸭疫里默氏杆菌iviD蛋白，成功地建立了鸭疫里默氏杆菌抗体ELISA检测方法。用该方法对江夏采样进行了检测，取得了理想的结果。对282份被检鸭血清进行检测，并将检测结果与传统的玻片凝集检测结果进行比较。结果，两种方法的阳性检出率分别为43.6%和31.7%；而与本实验室用多抗建立的ELISA方法比较，阳性检出率分别为43.6%和43.3%，基本相符。