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中药文化源远流长,中药方剂的应用距今已有两千多年的历史。一直以来,中药都以借其良好的疗效得到了广大国内患者认可。如今,中药复方制剂仍不能被国际社会广泛接受,中药文化的继承和发展进入了一个严峻的瓶颈阶段。究其根源,中药药对中配伍变化繁多,其有效成分也更加复杂多样,导致中药药效的物质基础难以确定,而国内对中药方剂的研究又趋于传统,无法为中药作用机制的阐明提供大量的科学依据。但是,中药的疗效还有稳定性问题没有解决,中药制剂现代化的研究缺乏一定的创新性,质量标准不能进一步改善等都受其限制。所以,中药药对的药效物质基础的进一步研究和新的研究方法的建立十分紧急,更是中药现代化研究中急需解决的重要问题。本文采用液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)技术,并对“当归-川芎”药对入尿的化学成分进行分析和鉴定,并对各化学物质的来源进行归属,对药对的药效物质基础及各单味药的化学成分变化进行研究。主要研究内容和成果如下:本实验第一部分应用HPLC-TOF/MS联用技术,在“当归-川芎”药对的液相色谱图中共标识了 18个主要色谱峰,并结合质谱和部分标准品信息,鉴定出15个化学成分,分别为β-谷甾醇、洋川芎内酯H、洋川芎内酯Ⅰ、孕烯醇酮、Z-藁本内酯、E-丁烯基苯酞、5-羟基-3-亚丁基苯酞、E-藁本内酯、3’,6,8’,3a-二聚藁本内酯、咖啡酸、丁基苯酞、阿魏酸、川考三萜、洋川芎内酯A、Z-丁烯基苯酞。本实验第二部分应用HPLC-TOF/MS联用技术,在含有药对的大鼠尿液样品中共标识了 21个主要色谱峰,并结合质谱和部分标准品信息,鉴定出17个化学成分,其中包括7个原型成分:β-谷甾醇、M1(阿魏酸葡萄糖醛酸结合代谢产物)、E-丁烯基苯酞、M2(阿魏酸葡萄糖醛酸结合代谢产物)、M3(阿魏酸甲基化代谢产物)、M4(阿魏酸牛磺酸结合代谢产物)、丁基苯酞、M5(阿魏酸乙酰化代谢产物)、洋川芎内酯Ⅰ/H、M6(阿魏酸还原代谢产物)、孕烯醇酮、M7(阿魏酸硫酸酯化代谢产物)、川芎三萜、M8(咖啡酸乙酰化代谢产物)、3’,6,8’,3a-二聚藁本内酯、M9(咖啡酸葡萄糖醛酸结合产物)、M10(咖啡酸硫酸酯化代谢产物)。本实验第三部分通过对药对在大鼠尿液中代谢途径的分析,得知川芎与当归同为伞形科,所含化学成分相近。由HPLC-TOF/MS解析,然后结合相关文献资料,推测出咖啡酸和阿魏酸是二者共同含有的物质,而且尿液中的代谢产物多数是由咖啡酸和阿魏酸经过甲基化,乙酰化,还原,水解,葡萄糖醛酸结合等化学过程完成的。从此可以推测出药对在尿液中的化学成分,二者均有贡献。以上研究成果确定了“当归-川芎”药对在大鼠尿液的最终代谢产物,对揭示药对的药效物质基础构成具有重要的科学价值,对于临床药理研究也有一定的指导意义。同时,HPLC-TOF/MS联用可以实现中药和复方中化学成分的迅速定性,为中药复方化学成分广泛和深入研究提供了新思路。