研究背景:高分辨质谱技术是质谱技术的一种,具有质量范围宽,扫描速度快,高灵敏度,高质量精度与高分辨率等优点,能够采集待分析物质的精确质量数据,区分复杂基质中的杂质及共流出物质,对痕量组分进行筛选和确证,在复杂物质体系的系统成分分析中具有很大的优势。目前已广泛应用于食品安全、环境安全以及药物安全等领域。研究目的:本文采用高分辨质谱技术进行了化妆品质量安全控制以及中药中复杂未知物成分分析:一、通过基质分散固相萃取结合超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对化妆品中可能存在的63种禁限用着色剂进行高通量筛查;二、通过超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对黄连解毒汤自沉淀和上清液化学成分及其血浆代谢物质进行分析比较,为黄连解毒汤自沉淀成为新的“药源”提供依据。研究内容与结果:研究对象一:化妆品中的禁限用着色剂建立了一种超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术筛查、确证和定量检测化妆品中63种禁限用着色剂的方法。化妆品样品采用基质固相分散萃取技术进行前处理,并通过单因素结合正交试验的方法考察了分散剂种类、洗脱溶剂种类以及洗脱溶剂体积,最终选择用Sand作为固相分散剂,2mL甲醇进行洗脱。通过对液相色谱和质谱参数的优化,结合完整的数据处理过程,在一次进样下,可以同时得到一级和二级质谱图。通过与精确质量数据库以及二级质谱库的比对,可以对化合物进行准确定性分析。通过方法学考察,63种着色剂在各自的线性范围内均呈现良好的线性关系,日内精密度与日间精密度分别低于11%和12%,加标回收率在64.0%～128.4%,相对标准偏差在0.9%～10.1%,均符合物质定量要求。该方法前处理简单、准确、快速、灵敏度高,不仅可以进行以筛查为目的的定性分析,还可以对化妆品中多种着色剂进行定量检测,适用于检测部门的日常检测。研究对象二:黄连解毒汤自沉淀与上清液化学成分分析建立了一种超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱定性分析方法,用于快速鉴别黄连解毒汤上清液和自沉淀两部分中多种化学成分。在正负离子模式下,共鉴定出32种生物碱类成分、40种黄酮类成分、9种环烯醚萜类成分以及包括酚酸和苯丙素在内的26种其他化合物,其中15种成分通过与标准物质保留时间、特征碎片离子对比进行了确认。发现黄连解毒汤自沉淀与上清液两部分中化学成分种类并无大的差异,为黄连解毒汤自沉淀成为新的“药源”提供了实验依据。另外对黄连解毒汤自沉淀和上清液所含有的成分中含量较高的14种组分进行了定量考察。建立了一种快速、准确的超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱定量分析方法,对14种标志性物质同时定量检测,并对其含量进行了比较。发现虽然化合物组成没有明显差异,但主要化合物的含量有很大的不同,小檗碱以及黄芩苷的含量在水煎自沉淀中比在上清液中有很大的提升,为进一步探索自沉淀形成机理提供了依据。研究对象三:黄连解毒汤自沉淀与上清液血中移行成分定性分析应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术,通过与空白血浆对比,在混合时间点取样处理得到的血浆样品中分析检测到了25种原型成分,包括10种生物碱类化合物、9种黄酮类化合物、1种环烯醚萜类化合物以及包括香豆素、倍半萜和苯丙烯酸在内的其他5种化合物。基于药物代谢研究的理论和方法,并结合黄连解毒汤的药理活性等相关文献报道,初步判断黄连解毒汤中生物碱类、黄酮类以及环烯醚萜类化合物可能是发挥主要药效的成分。通过对黄连解毒汤自沉淀和上清液两部分组分在血浆中原型成分进行比较,发现两部分在血浆中原型成分并无差异。可以进一步推断黄连解毒汤自沉淀与上清液可以发挥类似的药理作用,为黄连解毒汤自沉淀的药理应用提供依据。研究结论:本文利用高分辨质谱技术建立了化妆品中63种禁限用着色剂的分析方法,该方法前处理简单、定量准确、快速、灵敏度高,可以对化妆品中多种着色剂进行检测;建立了复杂中药基质样品中未知物筛查鉴定和目标物质定量方法,比较了黄连解毒汤自沉淀及上清液两部分化学成分及代谢物质差异,为自沉淀部分的应用提供了实验依据。