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研究背景：随着医疗仪器的革新和医疗技术水平的提高,外科“微创”治疗逐渐形成主流,在泌尿外科领域腔镜由于其微创应用较普遍,特别是针对上尿路结石输尿管镜(URS)和经皮肾镜(PCNL)碎石因其切口小、住院时间短、碎石效果好、术后恢复快等特点基本取代了传统的开放手术。但是在URS和PCNL手术过程中,为保持手术视野的清晰和冲洗出碎石后的结石碎片,我们通常需要给予手术区域高压力的液体灌注,而大部分患者在行碎石手术前由于结石导致梗阻,会使患侧肾脏出现不同程度的积水,积水肾脏实质较正常肾脏薄且已出现了不同程度的病变,碎石过程再给予高压力的液体灌注,是否会给本已病态的积水肾脏造成急性损伤?多大灌注压力才会造成积水肾的损伤?不同程度积水肾对灌注压力的耐受是否一样?目前,国内外未见相关报道。为此,我们以新西兰大白兔为模型,构建轻度、重度肾积水模型,并分别对积水模型进行压力灌注干预实验。其目的是：1.确定一种兔轻、重度积水模型的制作方法。2.探讨不同灌注压力对不同程度积水肾进行灌注时,多大灌注压力可引起轻度积水肾和重度积水肾的损伤。3.探讨不同灌注压力对不同程度积水肾进行灌注的分子损伤机制。实验方法：1.25只健康雄性新西兰大白兔,体重2.5-3kg,随机分为正常组(N组,n=5只),轻度积水组(M组,n=10),重度积水组(S组,n=10)。轻度积水组和重度积水组以1%的戊巴比妥钠1ml/kg耳缘静脉注射麻醉后,分离游离左侧输尿管后分别将无菌聚乙烯塑料导管套扎左侧输尿管3天和7天,术后行B超检测集合系统分离程度和肾实质厚度并取术侧肾脏行Masson染色。正常组麻醉后仅行输尿管分离,3天后进行B超检测系统分离程度和肾实质厚度并取术侧肾脏行Masson染色。2.另购买54只健康雄性新西兰大白兔顺利构造积水模型后,Ctrl组随机给予20mmHg、100mmHg压力的灌注液(0.9%生理盐水)灌注,M和S组均随机分为M0、M1、M2、M3和S0、S1、S2、S3四个亚组,0-3四个亚组分别给予0mmHg、20mmHg、60mmHg、100mmHg压力的灌注液灌注。间断灌注1小时,术后48h留取灌注侧肾脏标本,行HE染色,TUNEL检测组织细胞凋亡,免疫组织化学染色检测肾脏损伤分子1蛋白(KIM-1)和半胱氨酸蛋白61(Cyr-61)蛋白检测。3.肾脏部分标本通过线粒体膜电位检测试剂盒行线粒体膜电位检测,观察线粒体膜电位变化情况；部分标本行电镜检测,观察线粒体水肿情况；部分标本提取蛋白通过Western blot方法检测Cyt-C、 AIF、 Caspase-3、 Caspase-9、 Bcl凋亡相关蛋白。结果：1.B超结果显示N、M、S组左侧肾脏实质厚度分别为：0.36±0.06cm、0.31±0.05cm,0.22±0.04cm; N、 M、S组集合系统分离程度分别为：0.07±0.02cm、0.95±0.17cm,1.70±0.14cm.三组肾脏实质厚度和集合系统分离程度差异有统计学意义(p<0.05）。 N、 M、 S三组左肾纤维化比例(Masson染色阳性比例)分别为：0.5%±0.02%,15.4%±0.5%,27.6%±0.7%,其差异有统计学意义(p<0.05)。2.Ctrl组压力灌注后HE染色、组织细胞凋亡百分比、KIM-1和Cyr-61表达与M组和S组相比差异有统计学意义(p<0.05)；M组行0mmHg.20mmHg、60mmHg压力灌注时与0mmHg相比HE染色、组织细胞凋亡百分比、KIM-1和Cyr-61表达未见明显异常(p>0.05),行100mmHg时HE染色可见肾小管大量上皮细胞坏死脱落,肾小管细胞凋亡百分比明显增加,KIM-1和Cyr-61表达亦出现显著增加(p<0.05)；S组行0mmHg和20mmHg压力灌注时HE染色、组织细胞凋亡百分比、KIM-1和Cyr-61表达未见明显异常(p>0.05),行60mmHg和100mmHg时与0mmHg相比HE染色可见肾小管大量上皮细胞坏死脱落,肾小管细胞凋亡百分比明显增加,KIM-1和Cyr-61表达亦出现显著增加(p<0.05),两亚组间差异无统计学意义(p>0.05)。3.Ctrl组压力灌注后线粒体膜电位变化、线粒体空泡化比例、凋亡相关蛋白表达与0mmHg相比未见明显异常(p<0.05)；M组行0mmHg、20mmHg、60mmHg压力灌注时与0mmHg相比线粒体膜电位变化、线粒体空泡化比例、凋亡相关蛋白表达未见明显异常(p>0.05),行100mmHg时线粒体膜电位显著降低,线粒体空泡化比例增加,Cyt-C、AIF、 Caspase-3、 Caspase-9表达增加,Bcl表达减少(p<0.05)；S组行0mmHg和20mmHg压力灌注时线粒体膜电位变化、线粒体空泡化比例、凋亡相关蛋白表达未见明显异常(p>0.05),行60mmHg和100mmHg时与0mmHg相比线粒体膜电位显著降低,线粒体空泡化比例增加,Cyt-C、 AIF、 Caspase-3、 Caspase-9表达增加,Bcl表达减少(p<0.05),两亚组间差异无统计学意义(p>0.05)。结论：1.套管法分别梗阻兔输尿管3天和7天,是一种可靠又实用的建立兔轻、重度积水模型的方法。2.兔轻度和重度积水肾灌注压力分别达到100mmHg和60mmHg时即可造成肾脏显著的急性损伤,正常肾脏灌注压力达到100mmHg时未出现明显损伤。在行URS和PCNL手术碎石时,针对积水肾脏要尽量避免过高的灌注压力。3.高灌注压力导致的积水肾急性损伤与氧化损伤和线粒体途径导致组织细胞凋亡密不可分。