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研究背景无精子症在一般人群中的发生率为1%,在男性不育人群中的比例可达到10%-20%,是目前临床治疗的重点难点。无精子症通常分为梗阻性无精子症(OA)和非梗阻性无精子症(NOA),其中NOA在无精子症中约占60%左右,是目前辅助生殖技术面临的一个难题,外科手术取精结合ICSI已经成为NOA患者重要的助孕治疗方案。无精子症患者辅助生殖治疗的关键是要找到活动精子,在外科手术取精之前需要对无精子患者的睾丸生精功能进行评估,那么如何有效评估无精子症患者的睾丸生精功能,准确预测睾丸精子获取概率是男科医生比较关注的问题。目前即使是睾丸病理活检也不能完全准确预测精子检出率,因此,在睾丸活检的同时于高倍显微镜直视下寻找睾丸曲细精管组织悬液精子,是对睾丸病理检查的有益补充,目前尚无睾丸曲细精管组织悬液精子查找结果与睾丸病理分型及血清激素水平关系的研究。此外,高倍显微镜下精子是否活动对ICSI的临床结局有无影响尚无报道,因此,我们希望本研究能够对上述问题做出进一步的探索。研究目的1.探讨睾丸曲细精管组织悬液精子检出结果与睾丸病理分型及性激素水平的关系。2.探讨高倍显微镜直视下睾丸曲细精管组织悬液精子是否活动对ICSI临床结局的影响。3.探讨不同生精功能低下水平的精子行ICSI的临床结局是否一致。资料与方法收集413名在我中心行睾丸穿刺活检的患者资料,包括性激素水平、睾丸病理报告、睾丸曲细精管组织悬液是否可见精子及精子是否活动等资料,其中有130名患者进一步在我中心行ICSI。另外收集322对夫妇因男方无精子症行ICSI的资料。1.完善进入周期前相关资料,包括:现病史、既往史和体格检查,精液、性激素、染色体、Y微缺失等相关检查;2.进行睾丸活组织检查,根据病理及睾丸曲细精管组织悬液高倍镜下检查结果分组,在外院行睾丸活检的患者需借病理切片到我院会诊;3.女方取卵日男方行PESA或者TESA取精并进一步行ICSI;4.收集相关数据,分组进行数据分析,得出结论。结果1.高倍镜下睾丸曲细精管组织悬液可见活动精子组的睾丸生精功能良好,病理表现为生精功能正常、轻、中度低下(100.0%,115/115)。高倍镜下可见不动精子组的睾丸生精功能绝大部分优良,病理多表现为生精功能正常、轻、中度低下(94.3%,181/192),但其中有8例表现为重度生精低下,3例表现为生精阻滞。高倍镜下未见精子组的睾丸生精功能差,病理多表现为唯支持细胞综合征、生精阻滞及重度生精不良(97.2%,103/106),但其中3例表现为中度生精低下。2.睾丸生精功能正常,轻、中、重度低下、阻滞及唯支持细胞综合征组总的精子检出率分别为 1 00.0%、100.0%、96.2%、25.8%、12.0%、0.0%;活动精子检出率分别为41.0%、41.9%、29.5%、0.0%、0.0%、0.0%;不活动精子的检出率分别为59%、58.1%、66.7%、25.8%、12.0%、0.0%,有明显的统计学差异(P<0.05),睾丸生精功能越好精子检出率越高。睾丸曲细精管组织悬液未见精子组睾丸体积、激素水平与可见活动精子、不动精子组比较有统计学差异,以睾丸活检组织细胞悬液中是否能找到成熟精子为标准,睾丸病理分型、INHB、FSH的ROC曲线下面积分别为0.975、0.897、0.881。通过Youden指数分析,INHB临界值为91.31 pg/ml(敏感度93.1%,特异性77.8%);FSH临界值为6.73 pg/ml(敏感度87.1%,特异性81.9%)。3.不同生精功能组间年龄、睾酮比较无统计学差异,而睾丸体积、INHB、FSH、LH水平差异有统计学意义。睾丸体积、FSH、INHB、LH的AUC值分别为0.625、0.573、0.592、0.550,对区分睾丸病理状态的价值较低。4.高倍镜下睾丸曲细精管组织悬液可见活动精子组与不动精子组行ICSI的临床结局无显著性差异。睾丸生精功能正常、轻、中、重度低下的正常受精率依次为67.4%、66.7%、63.2%、47.1%,生精功能重度低下组的正常受精率较其它组显著降低。不同生精功能组间的卵裂率、优良胚胎率、临床妊娠率、分娩率无统计学差异。结论1、睾丸曲细精管组织悬液中可见精子(活动或不活动)的患者睾丸生精功能良好,尤其是可见活动精子组的睾丸病理分型均为生精功能正常及轻、中度低下,而组织悬液未见精子组其生精功能较差,因此,该方法是对睾丸病理的有益补充。2、睾丸病理是预测睾丸取精成功率最有效的指标;INHB和FSH虽然不能不能取代睾丸活检病理评估无精子症患者睾丸生精功能,但是能用于术前初步评估睾丸生精小管中是否存在成熟精子。3、高倍镜下睾丸曲细精管组织悬液精子是否活动不影响ICSI临床结局。4、睾丸生精功能重度低下只影响ICSI的正常受精率,对卵裂率、优质胚胎率、囊胚培养形成率、临床妊娠率、分娩率无影响。