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研究目的:1.观察治疗3个月后急性肺血栓栓塞(PTE)患者慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)的发生及影响因素;炎症因子在PTE患者中的表达;分析其危险因素。2.观察日本大耳白两次PTE模型中炎症因子的表达变化。研究内容及方法:1.根据临床表现,纳入符合研究标准的急性PTE患者,测量Wells评分及改善日内瓦评分;检测入院患者的血气分析、CRP、TNF-α;根据心电图计算心电图评分;超声心动图测量肺动脉直径、室间隔和室壁运动,在下腔静脉、右心房、右心室、肺动脉和左、右肺动脉分叉处观察血栓的存在情况。采用三尖瓣反流压差法计算肺动脉收缩压;计算Qanadli栓塞指数和Ma Stora栓塞指数,评估肺动脉和肺动脉分支;综合分析其危险因素。2.采用介入导管技术,以日本大耳白为实验对象,通过颈静脉注射自体血栓制作两次PTE模型,用4F猪尾导管测量肺动脉压;HE染色了解肺动脉的变化;酶联吸附试验检测血中的TNF-α;Western Bloting检测肺组织中的TNF-α;实时定量荧光PCR检测肺组织中的TNF-α。研究结果:1.根据纳入和排除标准,124例急性PTE患者中,112例患者符合纳入标准,排除12例患者中,其中5名为慢性阻塞性肺病患者,2名肺癌患者,3名患有心脏瓣膜病的患者,1名患有肺纤维化,1名患有先天性心脏病。2.随访情况:在112名患者中,13名患者脱落,其中3名在住院期间死亡、9名患者失访、1名患者出院后死于心力衰竭,共有99名患者达到3个月的随访终点。99例患者平均随访时间为27.8±14.2个月;随访时间最短为5个月,最长随访时间为60个月。3.患者的年龄在CTEPH组和非CTEPH组之间无统计学差异;男性患者在CTEPH组较高。4.心功能方面,右心房直径、右心室直径和CK-MB在CTEPH组与非CTEPH组比较有统计学差异。5.CTEPH组和非CTEPH组的溶栓情况比较,急性PASP、再发PTE具有统计学意义。6.检测患者血浆炎症因子,结果显示CRP、TNF-α在CTEPH组和非CTEPH组中有统计学差异。7.三个月CTEPH的影响因素分析,结果显示,急性期PASP、CK-MB、CRP、TNF-α是CTEPH组的危险因素(P<0.05);再发PTE可增加CTEPH 34倍左右;炎症因子的表达增加使CTEPH的发生率增加约2倍。8.通过颈静脉制作两次PTE模型,两次PTE组表现出呼吸道和紫绀,心率加速,尿急和躁动等症,血管造影证实局部肺动脉充盈缺损,截断或完全丧失。9.用4F猪尾导管测量肺动脉压,结果显示两次PTE组肺动脉压力持续增高,与对照组、一次PTE组相比有统计学意义。10.HE染色显示,两次PTE组可以看到肺泡周围有大量炎性细胞浸润,肺动脉血管可见血栓,血管壁疑似增厚。11.ELISA检测血浆中TNF-α,第一次介入手术注射栓子后,实验组TNF-α均增高,与对照组相比有统计学意义;第二次介入术注射栓子后,TNF-α持续增高,与对照组及一个PTE组相比有统计学意义。12.Western Bloting检测肺中的TNF-α,两次PTE组肺组织中TNF-α的表达显着增加(P<0.05)。13.实时定量荧光PCR检测肺的TNF-α,结果两次PTE组肺组织中TNF-α的表达显着增加(P<0.05)。研究结论:1.本研究纳入了112例急性PTE患者,其中99例终点随访3个月,CTEPH发生率为13.1(13/99)。急性期PASP、再发PTE、CK-MB、CRP、TNF-α均是CTEPH的危险因素,炎症因子在CTEPH中表达增强。2.本实验以日本大耳白为研究对象,通过颈静脉注射自体血栓制作两次PTE模型,模型建立成功。采用酶联免疫吸附试验,免疫组化和分子生物学方法比较PTE后模型中TNF-α和TNF-αm RNA的表达,血液中及肺脏中TNF-α表达均增强。结合既往本课题相关研究结果,栓塞后纤溶活性增强,TNF-α可能参与了炎症-凝血-血栓循环,炎症反应的研究可能为肺动脉高压的治疗提供新的解决途径。