【摘 要】
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基因治疗的关键就是选择安全有效的载体,非病毒载体因毒性低,生物相容性好,制备容易等一些优点,逐渐取代病毒载体,具有广阔的应用前景。本文设计合成了两个肽类阳离子类脂,其极性头
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基因治疗的关键就是选择安全有效的载体,非病毒载体因毒性低,生物相容性好,制备容易等一些优点,逐渐取代病毒载体,具有广阔的应用前景。本文设计合成了两个肽类阳离子类脂,其极性头部分别为甘氨酸和甘氨酸二肽,产品重结晶后,经过ESI-MS、1H NMR、13C NMR、IR和LC表征,结构准确,纯度较高,可以满足基因转染。将所合成的类脂制成阳离子脂质体,通过透射电镜分析检测,脂质体分布较均匀,粒径大小分布在50-200nm之间,可应用于基因转染实验。通过延滞实验考察脂质体与DNA的结合能力,结果表明,脂质体与DNA的结合能力随着脂质体/DNA比例的增大而增加;极性头部为甘氨酸二肽的阳离子脂质体与DNA结合能力强于头部为氨基酸的阳离子脂质体;助类脂DOPE的加入可以提高脂质体与DNA的结合能力。利用所制备的阳离子脂质体作为基因运载工具,转运质粒pGFP-N2,对Hep-2细胞株进行了体外转染,研究了肽类阳离子类脂结构与其转染效率之间的关系。结果表明,脂质体与DNA的比例为4/1-6/1之间转染效率较高;二肽头部的脂质体比甘氨酸头部的脂质体转染效率更好;助类脂DOPE的加入可使脂质体的转染效率提高。本文将为新结构阳离子类脂的研究提供参考和思路。
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