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本研究主要通过测定OD600值、pH值、产酸活力、代谢产物浓度和存活率等指标,系统研究了乳酸菌属的植物乳杆菌、布氏乳杆菌和屎链球菌生物学特性和干燥工艺参数,为研发青贮接种剂进而改善青贮料发酵品质,提供理论依据和实用参考。
本研究主要由以下四个试验组成:(一)不同乳酸菌培养条件的优化,通过测定菌液OD600值和pH值,绘制不同乳酸菌菌株的生长曲线、pH值曲线和温度曲线确定了菌种的最佳培养条件。(二)不同乳酸菌产酸活性的研究,通过测定不同乳酸菌产酸力的变化确定其最佳产酸时期。(三)不同乳酸菌代谢产物的研究,通过对不同有机酸含量的测定研究了不同乳酸菌在发酵过程中主要代谢产物的变化趋势。(四)不同乳酸菌干燥工艺参数的研究,通过测定干燥前后不同乳酸菌的存活率变化筛选出效果最好的冷冻干燥保护剂。在添加最佳保护剂的基础上,通过测定不同时间和不同温度对不同乳酸菌的存活率的影响确定其最佳贮存方式。
试验一结果表明:1)植物乳杆菌接种到pH值为6.66的MRS液体培养基中,30~C培养18h时,OD600值达到最大为8.41,最终pH值达到最低为3.6l。2)布氏乳杆菌接种到pH值为6.∞的MRS液体培养基中,30~C培养36h时,OD600值达到最大为5.41,最终pH值达到最低为3.98。3)屎链球菌接种到pH值为5.50的MRS液体培养基中,37℃培养28h时,OD600值达到最大为8.21,最终pH值达到最低为3.68。
试验二结果表明:植物乳杆菌、布氏乳杆菌和屎链球菌分别在培养18h、36h和28h时产酸力达到最大,分别为203.33%、221.33%和196%。
试验三结果表明:1)不同乳酸菌菌株均能产生大量的乳酸和乙酸,微量丁酸,没有丙酸。2)植物乳杆菌、布氏乳杆菌和屎链球菌分别在培养18h、36h和28h时乳酸和乙酸产量达到最高。
试验四结果表明:10%甘油+10%脱脂奶粉组表现出累加效应,可以增强菌粉存活率,使存活率高达到99%以上,效果最好,可作为3个乳酸菌菌株的最佳冷冻干燥保护剂;10%脱脂奶粉效果次之;空白对照组效果较差;10%甘油组效果最差。时间、温度二因子对菌粉存活率影响差异显著(P<0.05),贮存于4C和常温的菌种存活率较高,均达到90%以上,但以4~C贮存的存活率最高;一20~C贮存则存活率偏低,但也达到80%以上。