冰葡萄中7种成分含量测定方法的比较研究

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目的:通过高效液相色谱方法分析冰葡萄中有效成分的种类及含量,可以更好的明确冰葡萄的食用价值及药用价值,为今后开发冰葡萄保健食品奠定良好的理论基础。主要分为两部分:第一部分为不同含量测定方法分别测定冰葡萄中没食子酸、儿茶素、表儿茶素、绿原酸、咖啡酸、阿魏酸及芦丁的含量;第二部分为采用SPSS19.0对以上实验所测得的数据与方法进行统计分析。材料与方法:固定波长等度洗脱法利用正交分析,优选实验条件,并采用Diamosil C18色谱柱,直径为5μm(4.6×150 mm);柱温:室温;表儿茶素、儿茶素、阿魏酸、绿原酸、咖啡酸流动相为乙腈-0.05%磷酸(20:80,V/V),没食子酸、芦丁流动相为甲醇-0.5%磷酸(15:85,V/V);流速:1.0 mL/min;进样量10μL;表儿茶素、儿茶素检测波长为280 nm,阿魏酸、绿原酸、咖啡酸检测波长分别为325 nm,没食子酸、芦丁检测波长分别为270 nm、356 nm。固定波长梯度洗脱法与一测多评法采用Agilent C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-醋酸:水=2:98(B),梯度洗脱[0 min,A-B(6:94);14 min,A-B(12:88);30 min,A-B(20:80);40 min,A-B(40:60)],流速为1.0 mL/min,检测波长为280 nm,进样量为10μL。波长切换梯度洗脱法采用Agilent C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-醋酸:水=2:98(B),进样量为10μL,柱温:室温,梯度洗脱[0 min,A-B(6:94);14 min,A-B(12:88);30 min,A-B(20:80);40 min,A-B(40:60)]。波长切换见表1。(?)同时采用SPSS19.0统计分析软件,对之前所测得的冰葡萄中的成分含量数据进行统计分析,并比较运用各个方法之间有无显著性差异。结果:固定波长等度洗脱法所测得的冰葡萄中的成分的种类和量如下:没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、阿魏酸和芦丁含量分别为13550μg/g,78110μg/g,262.0μg/g,895.8μg/g,31550μg/g,80.88μg/g,764.5μg/g。固定波长梯度洗脱法所测得的冰葡萄中的成分的种类和量如下:没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、阿魏酸和芦丁含量分别为:8409μg/g、50090μg/g、59.67μg/g、132.0μg/g、8014μg/g、70.20μg/g、653.5μg/g。波长切换梯度洗脱法所测得的冰葡萄中的成分的种类和量如下:没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、阿魏酸和芦丁含量分别为:8604μg/g、55700μg/g、159.0μg/g、528.0μg/g、16130μg/g、71.37μg/g、676.6μg/g。一测多评法所测得的冰葡萄中的成分的种类和量如下:没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、阿魏酸和芦丁含量分别为:8469μg/g、50775μg/g、50.89μg/g、134.9μg/g、8128μg/g、69.98μg/g、650.5μg/g。统计分析部分采用了协方差分析法、聚类分析法中的系统聚类法和快速聚类法和判别分析法系统分析了所得到的数据,并得到了相应统计分析结论:一测多评法与外标一点法无显著性差异;测得的7种化合物按含量分成了3大类,把所测得的含量代入判别方程可以快速知道化合物的种类与名称。结论:1.冰葡萄中主要含有7种不同化合物,分别为没食子酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、阿魏酸和芦丁。2.采用不同的含量测定方法对7种化合物的含量测定的种类基本无影响。3.经统计分析证明,一测多评法适用于冰葡萄中7种不同化合物的含量测定;在对冰葡萄7种不同成分的质量评价中是适用可行的。
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