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本文运用RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA,随机扩增多态性DNA)技术,采用分离群体分组分析法(Bulked Segregate Analysis,BSA)对小麦抗病种质贵农775中抗白粉病基因进行分子标记,并对该标记进行克隆和测序.结果表明:1.以感病品种丰产3号为母本与抗病种质贵农775杂交,对杂交后代106株F<,2>分离个体和双亲,以白粉菌混合小种接种进行抗病鉴定.结果其中的77个单株表现抗病,29个单株表现感病,卡平方(x<2>)测验表明,(x<2><,c>=0.2013)<(x<2><,0.05,l>=3.84),说明F<,2>群体的抗感分离比例符合3:1,初步确定贵农775的白粉病抗性是由显性基因控制.2.依据BSA方法建立抗病池和感病池,通过RAPD实验,从256个随机引物中筛选出6个能在双亲及抗病池和感病池间具有多态性的引物.其中只有引物S2018(CTCGGATGTC)能在抗病亲本贵农775和抗病池中扩增出大小在800~900bp之间的标记带,而在感病亲本丰产3号和感病池中不能扩增出该标记带,经5次重复均能得出相同的结果.把贵农775抗白粉病基因的分子标记记为S<,2018-891>.用F<,2>分离群体进行遗传连锁性分析,结果77个抗病单株中有67个抗病单株具有S<,2018-891>标记,另外10个抗病单株和29个感病单株均无此标记带.经计算,S<,2018-891>标记与抗病基因间的遗传距离为8.9±2.9cM,说明该标记是与贵农775中抗白粉病基因相连锁的一个RAPD标记.3.用引物S2018对贵农775与邯农2号、百泉565、贵农105三个感病亲本杂交后代的F<,3>抗感株系进行RAPD检测.结果在贵农775和各组合的抗病株系中都能扩增出S<,2018-891>标记,而在感病亲本和各组合的感病株系中均缺乏该标记,说明S<,2018-891>标记与贵农775抗白粉病基因紧密连锁,在杂交育种过程中易于伴随抗病基因遗传,因此可有效利用该标记进行分子辅助选择.4.利用引物S2018对贵农775的原始亲本即节节麦、光稃野燕麦、偏凸山羊草和硬粒小麦进行RAPD检测,结果这四个原始亲本均没有出现S<,2018-891>标记.而利用该引物对贵农21、簇毛麦以及部分抗病核心材料进行RAPD检测时,这些材料均得出了S<,2018-891>标记,可以推测这些材料可能带有与贵农775相同的抗白粉病基因.5.从琼脂糖凝胶回收S<,2018-891>与载体pUCm-T连接,并将重组质粒转入大肠杆菌DH5α,通过IPTG/X-gal平板筛选,挑取白色菌落进行扩繁并提取质粒进行酶切鉴定后,筛选出阳性克隆并对克隆片段进行测序.测序结果表明标记片段为891bp.DNA同源性分析结果表明在该克隆片段的大约第347~524bp、427~524bp、680~710bp等序列与方穗山羊草、普通大麦、栽培一粒小麦的几个基因或克隆的部分序列以及亚洲栽培稻的第1,2,3,4,8,10,12等染色体上多个位点的序列具有较高的同源性(83％~100％).