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由世界卫生组织统计,癌症是世界范围内的主要死因,而肺癌是癌症相关性死亡的最主要原因之一,全球每年约1.8 million人新诊断为肺癌,占总癌症的12.9%,每年约1.6million人死于肺癌,占总癌症死亡人数的19.4%。在2017年,在United States据估计有222,500新诊断为肺癌,155,870人死于肺癌。癌症的发生发展的病因非常复杂。其中,microRNA的异常表达与癌症的发生发展密切相关。miR-365在皮肤癌中起着致癌作用,但其在肺癌中的作用仍不清楚。通过我们研究表明,miR-365在肺腺癌和肺癌细胞系中表达上调。miR-365的过表达促进肺癌细胞的增殖,迁移和侵袭。裸鼠模型的肺癌进一步证实了这些发现。通过分析发现USP33为miR-365的下游靶基因,并且在肺腺癌患者中观察到miR-365与USP33表达之间的负相关。进一步的实验表明,miR-365可以针对性下调USP33的表达。在miR-365过表达后,SLIT2和ROBO1下调,而同时过表达USP33和miR-365减轻了这种影响。提示,miR-365通过下调USP33/SLIT2/ROBO1信号通路促进肺癌的发生发展,miR-365/USP33/SLIT2/ROBO1轴是否成为促进肺癌发生发展的的新机制?在这项研究中,我们旨在调查其在肺癌中的作用和潜在的分子机制。材料与方法:1.采用PCR和Western blot方法检测miR-365在肺癌细胞系和肺癌组织中的表达。2.使用平板克隆形成和Edu实验验证miR-365的高表达对肺癌细胞增殖的影响,Transwell迁移、侵袭实验和伤口愈合实验观察,miR-365促进肺癌细胞的迁移和侵袭的作用。3.Western blot方法观察单独或联合USP33或miR-365的A549和SPC-A-1细胞中SLIT2和ROBO1的表达变化;miR365过表达后对USP33表达的影响,使用qRT-PCR定量检测来自20例肺腺癌的组织中miR-365和USP33的表达状况。双荧光素酶实验观察USP33和miR-365表达的负相关性。4.功能性回复实验中利用平板克隆形成和Edu实验,transwell迁移和侵袭测定以及伤口愈合测定miR-365是否通过USP33的下调促进了肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。5.裸鼠模型进一步证明miR-365促进体内肿瘤形成的机制。结果:1.miR-365在非小细胞肺癌组织和细胞株中表达上调;2.miR-365促进肺癌细胞的增殖和迁移、侵袭能力;3.miR-365可以靶向USP33并对USP33起抑制作用;4.miR-365通过下调USP33促进肺癌细胞增殖和迁移侵袭;5.miR-365 可以调节 USP33/SLIT2/ROBO1 通路;6.miR-365可促进小鼠皮下成瘤。结论:在本次实验中确定了 miR-365在肺癌中的作用和机制,验证了 miR-365在肺腺癌和肺癌细胞系中表达上调,通过细胞功能实验验证了 miR-365过表达可促进肺癌增殖,迁移和侵袭,USP33被发现为miR-365的下游靶基因,miR-365/USP33/SLIT2/ROBO1轴是肺癌新的发生发展机制。