CdS纳米粒子、CdS-EcoRI复合物与DNA相互作用的研究

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纳米生物技术是纳米技术和分子生物学的融合,是当今国际前沿和热点研究的课题之一。它的出现导致了一类崭新的用于生物和化学分析的多功能设备和系统的诞生。这些设备和系统不仅具备超高的灵敏度和识别速率,还具有特异性,因而被广泛地应用于分子识别、医疗诊断、药物传输、基因转染、生物分子的分离与检测等领域。纳米生物技术的重要领域还包括开发体内传感器,纳米级别的颗粒被设想为能够摄入或者注入人体,作为检测体内某些关键性的被分析物的报告者。这些纳米颗粒具有能够感应和传输信号到外部信号捕捉系统的能力,处于持续警戒状态的纳米颗粒将为个人的健康状态提供一个完全实时的、全天候的监测。然而,这些注入体内的纳米颗粒是否会与体内的生物大分子发生作用将直接危及到人的正常生理活动甚至生命,这将成为纳米生物技术领域急需解决的问题之一。本论文探究了应用广泛的半导体量子点CdS与生物体内重要的大分子DNA的相互作用,具体工作如下:1、采用红外光谱、紫外光谱、荧光光谱、圆二色光谱、原子力显微镜、琼脂糖凝胶电泳等技术研究了两种形状的DNA(线形λ-DNA和环状pBR322DNA)与两种粒径的CdS-COOH纳米粒子之间的相互作用。探讨了CdS-COOH纳米粒子的粒径、DNA的形状对两者相互作用的影响。并考查了限制性内切酶EcoRI在CdS-COOH纳米粒子存在下对DNA的生物酶切作用。结果显示CdS-COOH纳米粒子与DNA之间的相互作用方式为沟槽结合,小粒径的CdS-COOH纳米粒子与DNA的相互作用强于大粒径的CdS-COOH纳米粒子,环状pBR322DNA与CdS-COOH纳米粒子相互作用强于线形λ-DNA,CdS-COOH纳米粒子的存在一定程度阻碍了EcoRI对DNA的酶切。2、采用紫外光谱、荧光光谱、圆二色光谱、透射电镜、原子力显微镜、琼脂糖凝胶电泳等技术探究了带氨基的CdS-NH2纳米粒子与DNA的相互作用。结果表明带氨基的CdS-NH2纳米粒子与DNA的相互作用明显强于带羧基的CdS-COOH纳米粒子与DNA的相互作用,其作用方式仍然为沟槽结合。CdS-NH2纳米粒子的存在也在一定程度阻碍了EcoRI对DNA的酶切。3、采用光谱技术、琼脂糖凝胶电泳和原子力显微镜技术研究了CdS-COOH-EcoRI复合物与DNA的相互作用。探讨了CdS-COOH纳米粒子的粒径及作用时间对两者相互作用的影响。结果表明大粒径的CdS-COOH-EcoRI复合物与DNA发生了特异性给合,而小粒径的CdS-COOH-EcoRI复合物与DNA之间不但能够发生特异性结合,还存在星号活力结合。随着作用时间的延长,还出现非特异性结合同,并特异性地切割了DNA分子。CdS-COOH与EcoRI结合形成复合物后,能对EcoRI的酶活性产生一定的影响。
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