环境介质中6种Cl-PAHs分析方法的建立及Cl-Ant生物降解特性的研究

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多环芳烃由于其高毒性、在环境介质中广泛赋存而受到环境科技工作者的广泛关注,但目前关于其氯代衍生物的研究还非常有限。氯代多环芳烃(Cl-PAHs)可以看作是多环芳烃与二噁英的杂合体,是一类新型的高风险有机污染物。然而这类物质在环境中的分布、残留情况及环境效应尚不明确,开展Cl-PAHs的分析检测、环境行为、降解去除等基础研究具有非常重要的意义。本研究主要建立了水体和土壤中Cl-PAHs的分析检测方法,考察了南京化工园区及周边环境介质中Cl-PAHs的浓度水平,探索了黄孢原毛平革菌对Cl-Ant的降解性能。主要的研究工作及成果如下:1)建立了固相萃取(SPE)-气相质谱(GC-MS)联用测定实际水体中6种Cl-PAHs的分析方法。优化后的GC-MS分析条件为:进样口温度280℃,离子源温度250℃,传输线温度280℃。色谱柱程序升温:80℃保持1 min,25℃/min升温至20℃,再以1℃/min升温至213℃,保持1min。优化后的SPE萃取条件为:采用Poly-Sery HLB固相萃取小柱,预处理后以2ml/min的速率上样,用6ml正己烷和二氯甲烷(v/v,4:1)洗脱。所建立的分析方法在1-1000 ng/mL的线性范围内线性相关系数为0.9952-0.9995,LOD和LOQ分别为0.013-0.592 ng/L和0.043-1.971ng/L。除9-ClFle外,其他五种目标物的回收率在77.8%-105.4%之间,相对标准偏差小于9.37%。2)建立了加速溶剂萃取(ASE)—凝胶渗透色谱(GPC)-固相萃取(SPE)与气相色谱质谱(GC-MS)联用测定实际土样中6种Cl-PAHs的分析方法。优化后ASE的萃取条件为:在1500psi压力,100℃萃取温度下,以正己烷/二氯甲烷(v/v)1:1为萃取溶剂,静态萃取10min,循环4次。用萃取体积为90%的溶剂冲洗萃取池,最后氮气吹扫110s。最终确定的GPC收集时间为:25-35min,并以SPE萃取(HLB小柱)做进一步净化。收集洗脱液浓缩定容后用GC-MS分析。该方法对各目标物的低浓度回收率为64.1%-117.6%,RSD小于12.05%;高浓度回收率为 59.1%-105.3%,RSD 小于 9.81%。LOD 和 LOQ 为 2.6-25.1 pg/g和 8.7-83.6pg/g。3)考察了南京化工园区及周边水体和土壤中Cl-PAHs的赋存水平。采集园区污水处理厂、化工企业及滁河水样。测得∑Cl-PAHs的浓度在23.59-106.37 ng/L之间。比较发现采集的园区五个位点Cl-PAHs的总浓度明显高于滁河的四个位点,可以推测园区内受到了一定程度的Cl-PAHs的污染。采集土壤样品测定结果显示,Cl-PAHs在土壤中的赋存水平要高出水体中2-3个数量级,总浓度水平在12.77-61.10 ng/g之间。氯代蒽的污染水平较低,但分布范围较广。相反氯代芴的分布相对集中,但污染水平较高。4)研究证实了黄孢原毛平革菌对氯代蒽有一定的降解作用。液体培养基的初始pH为4.5,Pc接种量约为1×105个/mL。在35℃,120转/min的恒温摇床中培养6天后,接入浓度为2μg/mL的底物能够达到较高的降解效率。在此条件下降解16天后9-ClAnt和9,10-C12Ant的降解率分别达到了 96.45%和92.83%。所考察目标物降解符合动力学方程:9-ClAnt:y=0.032+0.5 8e(-037x+53)R2=0.9829,10-Cl2Ant:y=0.069+0.56e(-0.30x+0.51)R2=0.979分析代谢过程,从降解体系中检测到5种中间产物。结合生物催化反应的特点推测了氯代蒽可能存在的两种降解途径。
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