【摘 要】
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本文研究了藜蒿(Artemisia selengensis Turcz.AST)中总黄酮(total flavonoids,TF)及总生物碱(Total Alkaloids,TA)的提取、纯化,并对生物碱结构和抗乙肝病毒作用进行了初步研究。确定
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本文研究了藜蒿(Artemisia selengensis Turcz.AST)中总黄酮(total flavonoids,TF)及总生物碱(Total Alkaloids,TA)的提取、纯化,并对生物碱结构和抗乙肝病毒作用进行了初步研究。确定了藜蒿总黄酮的最佳水提和醇提的工艺参数。采用单因素实验和正交设计实验,对藜蒿总黄酮的乙醇提取工艺和水提工艺分别进行了系统考察。以芦丁为标准品,以总黄酮得率作为考察指标,经聚酰胺柱层析分离纯化,藜蒿总黄酮的乙醇最佳提取工艺条件为:70℃用20倍量45%乙醇提取2次,每次1.75h。藜蒿总黄酮的最佳水提工艺条件为:95℃用25倍量的水提取2次,每次1.5h。醇提法0.412%的得率比水提总黄酮0.372%略高。优化藜蒿总生物碱的提取条件。采用L9(34)正交试验考察了乙醇浓度(A)、硫酸浓度(B)和提取温度(C)三个因素对藜蒿生物碱提取的影响,分别使用沉淀法和薄层法对样品进行了定性测定,采用重量法对提取样品进行了定量测定。藜蒿经过80%乙醇和4%的硫酸回流提取后,减压蒸馏,12000r/mim高速离心,真空抽滤再用氯仿萃取五次,减压蒸馏,真空抽滤,真空干燥,最后得到总生物碱固体样品。研究了生物碱的硅胶柱层析纯化工艺,并对分离后的一个含量较大的样品进行了初步结构表征。使用硅胶柱色谱进行了梯度洗脱,各洗脱液进行TLC、RP—HPLC分析。其中的一个组分进行了UV、IR、LC-ESI-MS、1HNMR和13CNMR的综合解析,对其结构进行了部分表征。研究了生物碱对乙肝病毒(Hepatitis B virus,HBV)的体外抑制作用。采用ELISA酶标法对根、茎、叶及柱层析分离的两个纯化样品倍比稀释后进行了抗乙肝病毒试验研究。
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