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高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography, HPLC)是在当今分析化学领域应用中最为广泛的一种分析测试手段及分离技术，应用范围较广，涉及医药、环保、生命科学、食品分析、石油化工等基础研究领域。该方法具有分离效能好、分析速度快、灵敏度高、操作简单等优点。在色谱分析中，样品的前处理工作是色谱分析的一个极其重要的步骤，因为它直接关系到测定结果的准确性，故受到许多分析工作者的极大关注。建立简单、快速、有效、环保的样品前处理方式是广大色谱分析工作者一直所追求的目标。 本文包括两个部分，第一部分为综述:该部分主要介绍高效液相色谱的发展与特点和样品前处理方法的进展以及课题的研究意义。第二部分为研究报告:样品前处理技术在中草药活性成分中的应用，开展了一些工作，主要内容如下: 1.离子液体分散液相微萃取-HPLC测定葛根中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量采用高效液相色谱法(HPLC)建立了同时测定葛根中葛根素、大豆苷和大豆苷元含量的方法，样品采用离子液体分散液相微萃取法提取。方法:Phenomenex C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.2％冰醋酸溶液(45∶55)检测波长250 nm;柱温35℃;流速0.8 mL/min。结果:葛根素、大豆苷和大豆苷元的质量浓度与峰面积分别在0.00312～156(r=0.99971)，0.00272～136(r=0.99985)，0.0028～140μg/mL(r=0.99994)呈良好的线性关系。结论:该方法快速，简便，重复性好，适合于同时测定葛根中葛根素、大豆苷和大豆苷元的含量。 2.非离子表面活性剂-超声辅助萃取-高效液相色谱同时定金银花中绿原酸和咖啡酸的含量目的:以3g/100ml非离子表面活性剂Triton X-100为萃取剂，建立一种简单快速的采用超声提取，高效液相色谱法测定金银花中绿原酸和咖啡酸的方法。方法:采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5μm);流动相:甲醇-0.6％冰醋酸水溶液(25∶75，V/V);流速:0.80 mL/min;紫外检测波长:326 nm;柱温:35℃。结果:该方法对绿原酸和咖啡酸分别在0.00076～190μg/mL(0.99995)，0.000864～216μg/mL(r=0.99966)范围内线性关系良好，定性检测限(S/N=3)依次为:0.029 ng/mL,0.030 ng/mL，样品回收率为95.13％～100.24％。结论:该方法具有样品前处理简单、绿色环保、灵敏快速等优点，可为金银花中绿原酸和咖啡酸的检测提供一个有效的方法。 3.HPLC同时测定高良姜中六种活性成分建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定不同产地的高良姜药材中原儿茶酸、槲皮素、山奈酚、高良姜素、姜黄素和大黄素含量的方法。方法:采用C18柱(250mm×4.6 mm,5μm)，流动相为乙腈-0.1％冰醋酸水溶液梯度洗脱，检测波长260 nm，柱温35℃，流速0.8 mL/min。结果:原儿茶酸、槲皮素、山奈酚、高良姜素、姜黄素和大黄素分别在0.0287～143.33μg/mL(r=0.9997)，0.0267～133.33μg/mL(r=0.9999),0.0233～116.67μg/mL(r=0.9999),0.022～110.00μg/mL(r=0.9997),0.034～170.00μg/mL(r=0.9998),0.0207～103.33μg/mL(r=0.9996)与峰面积呈良好的线性关系，平均加标回收率(n=9)均在93.07％～98.77％，仪器精密度(n=6) RSD均小于3.78％，方法重复性(n=6)的RSD均小于3.12％。结论:该分析方法快速、准确，重复性好，可作为高良姜的质量控制方法。 4.HPLC同时测定24种花中五种活性成分含量建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定24种花中绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素含量的方法。方法:采用C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，流动相为甲醇-0.2％冰醋酸水溶液梯度洗脱，检测波长350nm，柱温35℃，流速0.8mL/min。结果:绿原酸、金丝桃苷、槲皮素、木犀草素和异鼠李素分别在0.0208～104.00μg/mL(r=0.99993),0.017～85.00μg/mL(r=0.99998),0.0172～86.00μg/mL(r=0.99997),0.0304～152.00μg/mL(r=0.99997),0.0168～84.00μg/mL(r=0.99986)与峰面积呈良好的线性关系，平均加标回收率(n=9)均在92.26％～99.09％，仪器精密度(n=6) RSD均小于3.12％，方法重复性(n=6)的RSD均小于3.62％。结论:本实验首次采用HPLC法测定这24种花中绿原酸和黄酮的含量，该分析方法快速、准确，重复性好，可作为花中活性成分定量分析的方法。