目的:金属镉可以通过食物链进入人体并在人体中蓄积。金属镉也可以与体内的巯基蛋白结合导致蛋白功能丧失,引起氧化应激、凋亡、坏死等。HMOX1基因在体内目前多数研究认为是保护因子的一种,在抗炎、抗氧化应激以及免疫调节方面起到至关重要作用。本文研究Cd²⁺处理的HeLa细胞中调控HMOX1表达的启动子活化区域,初步鉴定转录因子。以期理解在女性生殖系统中抗Cd²⁺毒性机制中HMOX1转录调节的机制。同时该研究也为临床上以后治疗Cd²⁺引起氧化应激相关的疾病提供依据。方法:通过普通PCR和Western Blot分别检测0?mol/L、1?mol/L、2?mol/L、5?mol/L、10?mol/L、20?mol/L、50?mol/L Cd²⁺处理HeLa细胞后HMOX1分别在mRNA与蛋白水平的变化;用构建载体PGL6-HMOX1-846转染HeLa细胞24小时后用不同浓度氯化镉处理,12小时,通过报告基因确定后续实验的最适Cd²⁺浓度;用PGL6为载体构建系列启动子报告基因,通过系列报告基因检测鉴定HMOX1启动子的活化区域,初步确定启动子的活化区域;根据活化区域预测转录因子,设计对应引物,通过普通PCR初步鉴定HMOX1的转录因子。结果:（1）Cd²⁺处理的HeLa细胞模型中和对照组相比,10?mol/L、20?mol/L、50?mol/L Cd²⁺处理的HeLa细胞,HMOX1在mRNA与蛋白水平的变化差异均有统计学意义（P<0.05）;（2）报告基因检测确定最适Cd²⁺浓度为10?M;（3）报告基因检测逐步发现:和HMOX1-577⁺92启动子活性相比,逐步发现HMOX1-587⁺92和HMOX1-567⁺92的活性升高（P<0.05）,说明HMOX1启动子片段-577^-567和-587^-577分别存在抑制性和激活性转录因子结合位点;（4）和PGL6相比,HMOX1启动子片段在-272^-28活性均显著升高（P<0.05）,而启动子片段在-14⁺29活性均无明显变化（P>0.05）,说明HMOX1启动子片段在-28^-14存在激活性转录因子结合位点;（5）突变启动子报告基因发现:与PGL6-HMOX1-272⁺92相比,HMOX1启动子片段-28^-26和-19^-11突变后启动活性均显著降低（（49）<0.05）,说明在该位置上可能存在HMOX1激活性转录因子结合位点;（6）根据启动子活化区域-30^-10的碱基序列预测可能的转录因子,通过普通PCR初步验证转录因子为MYC。结论:一定浓度Cd²⁺处理宫颈癌细胞后,HMOX1基因在蛋白和mRNA水平表达均上调;HMOX1启动子片段-587^-577和-577^-567分别存在激活性和抑制性转录因子结合位点;HMOX1启动子片段在-30^-10内存在激活性转录因子结合位点且通过这个片段初步研究转录因子为MYC。