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抑制素(Inhibin,INH)和活化素(Activin,Act)是由卵泡颗粒细胞分泌的二聚体糖蛋白,INH由α亚基与β亚基组成的同源二聚体,Act由两个β亚基构成的同源二聚体,二者都属于TGFβ超家族成员。INH主要表达于大卵泡的颗粒细胞,功能是抑制垂体促卵泡素(FSH)的分泌、抑制卵泡颗粒细胞FSHR的表达和卵泡发育;Act主要表达于小卵泡的颗粒细胞,主要功能促进垂体FSH的分泌、促进卵泡颗粒细胞FSHR的表达和卵泡发育。文献和课题组前期大量工作表明,主动和被动免疫抑制素α亚基(INHα),可以提高母畜血液中FSH和Act的浓度,提高排卵率和产仔数。但是在排卵后的卵泡发生波中小卵泡分泌Act水平在INH免疫动物中依然比未免疫动物高,而有文献报道Act抑制黄体化颗粒细胞的孕酮(P4)分泌,因此免疫INH可能会通过上调Act水平而抑制黄体P4分泌,影响动物的受胎率和分娩率。在猪、牛和羊,妊娠早期人绒毛膜促性腺激素(hCG)处理可以改善黄体功能和子宫内环境、促进早期胚胎发育,最终提高受胎率。因此,本论文拟探究免疫INH结合hCG处理是否能达到既提高经产母猪排卵率和产仔数,又提高母猪受胎率的目的。动物试验:经产母猪随机分成三组,对照组(Con,n=56)、单独免疫组(T1,n=56)和联合组(T2,n=50)。T1组和T2组在断奶前7 d免疫INHα,Con注射生理盐水佐剂;三组母猪在断奶后5~7 d发情配种,联合组在配种后5 d注射1000 IU hCG。结果表明,免疫组母猪的发情率稍高于对照组(对照组89.29%,试验组93.40%)。T1组的分娩率(76.78%)比对照组(82.14%)低6.98%,T2组的分娩率(86%)比T1组高12.01%。T1组和T2组的产仔数比对照组高0.85头和0.7头,活仔数高0.96和0.69头。以上动物试验结果表明,单独免疫INH可以促进母猪卵泡发育和产仔数,但是也会降低分娩率;hCG注射则可以逆转免疫INH对受胎率的不利影响。细胞试验:为解释动物试验结果,本研究采用forskolin诱导的猪黄体化颗粒细胞(LGCs)作为研究对象,并添加Act和(或)hCG,检测细胞培养液中P4浓度,并检测P4合成酶以及细胞周期蛋白的基因和蛋白的表达,来探究Act和hCG对黄体的调节功能。结果表明,10μM forskolin处理后,颗粒细胞P4分泌量大幅上升,由本底的10 ng/mL上升200倍至2000 ng/mL,这表明foskolin可以诱导颗粒细胞的黄体化。与孕酮分泌对应,foskolin处理后,P4合成酶StAR、Cyp11a1和3β-HSDII的表达分别上升了8倍、4倍和10倍。Act处理后,LGCs P4分泌下降35%,但是StAR、Cyp11a1和3β-HSDII的基因表达下调至黄体化之前的水平。hCG单独处理,则可以继续增加LGCs P4的分泌,上调StAR和3β-HSDII的表达,但是Cyp11a1的表达与LGCs相比反而显著下降。hCG与Act同时处理后,hCG可以部分缓解Act对StAR和Cyp11a基因表达的抑制,完全逆转Act对3β-HSDII的表达的抑制。Cyp11a1和3β-HSD蛋白表达与基因表达趋势相同。以上体内和体外结果表明,免疫INH结合hCG处理可以提高经产母猪排卵率和产仔数,同时又能提高母猪受胎率。这种新颖的繁殖调控技术的应用,将可以有效的提高种猪生产的经济效益,极大促进我国的养猪业发展。