球孢白僵菌(Beauveria bassiana)作为一种经典的昆虫病原真菌,在害虫防治中应用广泛。其抗逆分子机理直接关系到生防制剂的田间防效,科学与实践意义重大。本研究开展了对酰基-辅酶A脱氢酶APH结构域即氨基糖苷磷酸转移酶Bbaph的功能分析,并对两种昆虫病原真菌中结构相似的ABC转运蛋白进行功能分析。主要结果如下：球孢白僵菌Bbaph基因的功能球孢白僵菌氨基糖苷磷酸转移酶Bbaph的全长1226bp,含2个外显子和3个内含子,编码366个氨基酸。由Bb2860野生株构建敲除株ΔBbaph和回补株ΔBbaph/Bbaph,进行表型分析。与野生株和回补株相比,ΔBbaph产孢量、耐45℃热胁迫的能力、耐UV-B紫外辐射的能力以及对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)二龄幼虫的毒力分别下降92%、37%、27%及21%。敲除株对15-45mM过氧化氢和2-3mM甲萘醌氧化胁迫的抵抗力上升18%～50%,对多菌灵、三环唑、申嗪霉素、嘧菌酯、菌核净等不同类型的化学药物的抗性下降10%--68%。除半乳糖之外,多种碳源和无机氮源都促进敲除株生长,而有机氮源则抑制其生长。野生株与回补株之间无任何表型差异。由此说明,Bbaph基因参与调控球孢白僵菌的产孢、生长及多胁迫抗性。两种昆虫病原真菌中结构相似ABC转运蛋白的功能比较球孢白僵菌和玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)均存在一种结构相似的ATP结合匣即ABC转运蛋白,分别记为BbTl和IfT1。为了比较这一转运蛋白在两种真菌中的的生物学功能,由Bb2860野生株构建BbTl的敲除株和回补株,并将IfT1在BbTl敲除株中异源重组表达,然后测定各菌株的表型。与野生株、回补株及异源重组株相比,敲除株对20-40mM过氧化氢和2～8mM甲萘醌氧化胁迫的抵抗力下降27%～2.1倍,对多菌灵、伊曲康唑、菌核净、放线菌酮、乙嘧酚和4-硝基喹啉N-氧化物等不同类型化学药物的抗药性下降28%～4.7倍,对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力下降20%左右,而野生株、回补株及异源重组株之间无任何显著的表型差异。结果表明,BbTl和IfT1是结构相似且功能一致的ABC转运蛋白,分别是两种生防真菌多药抗性的重要决定因子之一,因参与抗氧化反应而对毒力有所贡献。综上所述,球孢白僵菌酰基-辅酶A脱氢酶APH结构域即氨基糖苷磷酸转移酶Bbaph和ABC转运蛋白都是产孢、生长及抗逆性状的重要调节因子,后者还是多药抗性的决定因子之一。这些结果增添了生防真菌抗逆分子机理的认识。