论文部分内容阅读
以往的研究表明，下丘脑室旁核(paraventricular nucleus，PVN)是调控胃缺血一再灌注损伤(gastric ischemia-reperfusion injury，GI-RI)特异性中枢核团之一。本工作的目的是研究PVN内注射血管紧张素Ⅱ对大鼠GI-RI的保护作用及其机制。本实验采用健康Sprague-Dawley大鼠，PVN注射血管紧张素Ⅱ(Angioterlsin Ⅱ，Ang Ⅱ)后，制备胃缺血-再灌注(GI-R)模型，运用免疫组化及免疫印迹等实验技术，观察了PVN注射一定剂量AngⅡ后，复灌不同时间点胃粘膜的损伤指数和细胞增殖凋亡的变化、TNF-α，NF-κ B通路的激活及凋亡相关基因bcl-2、bax的表达，揭示PVN注射一定剂量AngⅡ在大鼠GI-R的不同时间，胃粘膜细胞增殖和凋亡的变化规律，TNF-α，NF-κ B的激活规律，以及TNF-α，NF-κB的活化与胃粘膜细胞凋亡和增殖修复的关系。
结果显示：(1)下丘脑PVN注射不同剂量Ang Ⅱ对GI-RI有不同的影响。其中，PVN注射中等剂量AngⅡ(0.3ul含30ng AngⅡ)能明显减轻GI-R胃粘膜损伤(P<0.05)；而PVN注射小剂量(0.3ul含3ng Ang Ⅱ)对GI-R没有影响，另外应用大剂量Ang Ⅱ(0.3ul含300ng Ang Ⅱ)与中等剂量组没有统计学差异。因此，本实验均采用中等剂量作为实验组注射剂量。(2)PVN+Ang Ⅱ+GI-R组与GI-R组相比，PVN注射一定剂量AngⅡ能明显减轻GI-R后0.5h、1h、3h胃粘膜的损伤，使糜烂坏死减少。(3)PVN+AngⅡ+GI-R组与GI-R组相比，胃粘膜细胞凋亡减少，细胞的增殖加快。PVN+Ang Ⅱ+GI-R组复灌1h凋亡阳性细胞(M30 CytoDEATH阳性细胞)百分比和增殖阳性细胞(PCNA阳性细胞)百分比分别是GI-R组的76.7％和161％(P＜O.05)。(4)PVN注射一定剂量AngII能明显减少GI-R胃粘膜细胞内TNF-a及NF-kB的表达。免疫组化显示，复灌1h：PVN+AngII+GI-R组TNF-a阳性细胞百分比是GI-R组的78.16％(P＜0.05)，PVN+AngII+GI-R组NF-κB阳性细胞百分比是GI-R组的51.23％(p＜0.05)；免疫印迹显示，复灌1h，PVN+AngII+GI-R组胃粘膜细胞胞核中NF-KB蛋白含量较GI-R组明显降低(p＜0.05)。(5)PVN+Ang II+GI-R组与GI-R组相比，PVN注射一定剂量AngII能明显升高缺血一再灌注0.5h、lh、3h抗凋亡因子bcl-2水平(p＜0.05)。同时PVN注射一定剂量Ang II可以明显降低缺血一再灌注0.5h、lh、3h的促凋亡因子bax的水平(p＜0.05)。
结论：PVN注射一定剂量Ang II后对胃粘膜GI-RI具有显著的保护作用，这种保护作用与胃粘膜细胞的增殖和凋亡有关。PVN注射一定剂量Ang II通过抑制胃粘膜细胞的TNF-a表达从而减少NF-KB的激活，提高其下游的抗凋亡、促增殖的调控因子bcl-2的表达，抑制促凋亡的调控因子bax的表达，来实现其保护作用。