目的：本实验以三株人大肠腺癌细胞株SW620、HCT-8、LS-174-T为研究对象,通过构建pc-DNA3.1(-)-hARD1真核表达载体,转染至三株人大肠腺癌细胞株后,建立hARD1稳定过表达的三株大肠腺癌细胞系,观察大肠腺癌细胞的增殖变化的情况,从而探讨hARD1在大肠癌发生、发展中的作用。方法：1.hARD1目的基因的设计合成；2.利用重组DNA技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定真核表达载体pcDNA3.1(-)-hARD1;3. SW620、HCT-8、LS-174-T细胞的培养；4.通过脂质体介导的转染技术和G418细胞筛选法,将所构建的重组质粒导入三株人大肠腺癌细胞株,构建]hARD1过表达的稳定细胞系；5.应用Western blot法检测]ARD1稳定过表达的三株大肠癌细胞系中]ARD1的表达情况；6.采用EDU法检测过表达hARD1对三株人大肠腺癌细胞增殖的影响；结果：1.PCR扩增hARD1目的基因,琼脂糖凝胶电泳获得大约700bp的目的基因,提示目的基因扩增成功；2.经双酶切鉴定出700bp的hARD1目的基因片段和约5000bp的载体片段带,证明pcDNA3.1(-)-hARD1重组质粒构建成功。G418试剂成功筛选hARD1稳定过表达的三株大肠腺癌细胞系；3.EdU检测结果提示：实验组与空白对照组及阴性对照组比较,实验组的三株细胞增殖比例均明显升高,阴性对照组与空白对照组比较,阴性对照组的三株细胞增殖比例均明显降低；结论：1.本实验成功构建重组质粒pcDNA3.1(-)hARD1;2.转染了pcDNA3.1(-)hARD1重组质粒的三株大肠腺癌细胞系能够实现hARD1的成功高表达。3.本实验初步验证了人为干预hARD1在大肠腺癌细胞中高表达后,细胞增殖发生明显变化。4. hARD1重组质粒的成功构建,可为进一步研究hARD1与大肠癌的相关性及人工干预hARDl的高表达对其他不同肿瘤所产生的影响提供了有效的工具。