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背景及目的：胃癌的多药耐药成为胃癌化疗的瓶颈,但是多药耐药机制仍不清楚。MDR1/P-gp为多药耐药机制中重要的耐药蛋白之一,其在耐药的胃癌细胞株是高表达的。糖酵解关键酶PKM2在胃癌中高表达且与胃癌细胞分化程度相关。PKM2在肺癌与卵巢癌中与耐药密切相关。本研究评估了PKM2是否与胃癌耐药有关,是否通过调节MDR1/P-gp导致对药物敏感性的改变。方法：用Western Blot检测MKN28、MKN45、SGC7901、BGC823四株胃癌细胞的PKM2和P-gp的蛋白表达水平,初步评估PKM2与P-gp的关系。构建干扰PKM2的shRNA’慢病毒载体,酶切测序验证构建正确后在293T细胞中利用三质粒系统包装病毒,转染靶细胞及用嘌呤霉素筛选稳定转染株。用Western Blot验证基因沉默效果。用MTT法检测基因沉默后细胞的增殖能力及对药物的反应。最后用Western Blot检测基因沉默后相关分子如FoxO3a及P-gp蛋白水平的改变,初步探讨PKM2与耐药的关系。结果：在高分化的胃癌细胞株MKN28上P-gp的蛋白水平表达较高,但PKM2表达相对较低,在低分化胃癌细胞株MKN45、SGC7901、BGC823中P-gp表达相对较低,PKM2表达相对较高。成功构建沉默PKM2的慢病毒载体转染MKN45细胞后经Western Blot鉴定显示PKM2在蛋白水平上表达明显降低。MTT法检测沉默PKM2后的MKN45细胞生长明显受抑制,检测其对于5-Fu、DDP、EPI的药物敏感性,发现与LeshNC组相比,LeshPKM2组对于5-Fu、DDP、EPI均显示有一定的耐药,但是5-Fu组无统计学差异,DDP组从20μM(抑制率60%vs68.58%,P=0.0002)起,EPI组从30μM(抑制率73.90%vs80.13%,P<0.0001)起对于MKN45-PKM2-shRNA的抑制作用明显减弱且有统计学意义(P<0.05)。沉默PKM2后上调了FoxO3a及P-gp的蛋白表达水平。结论：PKM2与胃癌耐药相关。PKM2通过调节FoxO3a及P-gp导致胃癌细胞对于顺铂和表柔比星的耐药。