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目的:
观察补肾通脉方对伴胰岛素抵抗(IR)的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠IR和排卵障碍的影响,检测补肾通脉方对肝脏、脂肪、肌肉和卵巢组织中磷脂酰肌醇-3激酶(PI-3K) p85α亚基及蛋白激酶B(PKB)α亚型的mRNA及蛋白表达水平的作用,从而探讨其改善IR和排卵障碍的分子机制。
方法:
23日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9mg·100g-1·d-1共20天,联合高脂饮食喂养80天建立伴IR的PCOS大鼠模型,成模大鼠随机分为模型组和治疗组。治疗组大鼠以补肾通脉方进行干预。另设15只同龄大鼠为对照组。HE染色观察大鼠卵巢的组织学改变及排卵情况。葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG)。放射免疫法测定空腹胰岛素(Fins)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的含量。采用RT-PCR检测PI-3K p85α及PKBα的mRNA表达。采用免疫组化和western-blot检测PI-3K p85α及PKBα的蛋白表达。
结果:
与对照组比较,模型组大鼠卵巢呈现多囊样改变,平均排卵数及排卵率均明显低于对照组(P<0.01),FBG和Fins浓度显著升高(P<0.05或P<0.01),胰岛素敏感指数(ISI)显著降低(P<0.01),T、E2和LH浓度均显著升高(P<0.05或P<0.01),FSH浓度显著降低(P<0.01),靶组织PI-3K p85α及PKBα的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠卵巢卵泡内颗粒细胞层数明显增加,平均排卵数及排卵率均明显增加(P<0.01),Fins浓度显著降低(P<0.01),ISI显著升高(P<0.01),T和E2浓度均显著降低(P<0.01),FSH浓度显著升高(P<0.01),靶组织PI-3K p85α及PKBα的mRNA和蛋白表达水平均明显增加(P<0.01或P<0.05)。
结论:
补肾通脉方具有改善IR和排卵障碍的作用,其机制可能与其上调伴IR的PCOS大鼠靶组织PI-3K p85α及PKBα的mRNA和蛋白表达有关。