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目的:研究振荡剪切应力（OSS）诱导人脐血来源的内皮祖细胞（EPCs）分泌的外泌体对EPCs发生内皮-间质转化（EndoMT）的影响及其作用机制。方法:（1）应用人外周血淋巴细胞分离液分离健康孕妇脐带血中的单个核细胞,接种于预包被有纤维粘连蛋白（Fn）的细胞培养瓶中,加入含10%胎牛血清的EGM-2完全培养基。倒置相差显微镜观察0 d,7 d,14 d的细胞形态;采用Di L-Ac-LDL和FITC-UEA-1双吞实验对EPCs进行鉴定;（2）将EPCs分为静止组（Static）和OSS干预组（OSS）,实验前以无外泌体血清培养基孵育12 h。Flexcell flow STR-4000平行板流室系统对EPCs加载OSS（±3.5 dyne/cm2,1 Hz）干预12 h后,收集灌流液,冻干,利用exo Easy Maxi Kit试剂盒提取外泌体,电镜观察外泌体形态、纳米粒径电位分析仪检测外泌体大小、PKH26染色检测外泌体膜性结构,蛋白免疫印迹（WB）检测外泌体特异性蛋白CD9、CD81以及CD63的表达;（3）分别用静止组外泌体（Static-Exos）和OSS组外泌体（OSS-Exos）干预EPCs,Matrigel检测EPCs体外管腔形成能力;Ed U实验检测EPCs增殖功能;q RT-PCR及WB分别检测内皮细胞标记分子VE-cadherin、CD31和间质细胞标记分子α-SMA、SM22α基因及蛋白的表达;（4）构建裸鼠体内成血管动物模型,局部移植CM-Di L标记的EPCs,7 d后取移植物,冰冻切片免疫荧光染色检测内皮细胞标记分子v WF、CD31和间质细胞标记分子α-SMA、SM22α的表达;HE染色检测体内血管生成;（5）通过q RT-PCR检测两组外泌体（Static-Exos和OSS-Exos）中环状RNA Circ-1199的表达。然后将两组外泌体分别加入到EPCs培养基中,利用CY3标记的Circ-1199荧光探针和RNA.FISH试剂盒检测EPCs中Circ-1199的细胞定位及表达情况;（6）双荧光素酶报告基因检测Circ-1199和let-7g,以及let-7g和其下游靶基因HMGA2的靶向调控关系;再通过q RT-PCR检测Circ-1199、let-7g以及HMGA2的m RNA表达情况,WB检测HMGA2、p-Smad3/Smad3、Snail的蛋白表达。结果:（1）刚分离的单个核细胞呈悬浮的圆球状,7 d后部分细胞呈短梭形或小杆状,部分细胞聚集成集落;传代后的细胞呈现内皮细胞典型的铺路石样结构。细胞呈现Di L-Ac-LDL（红色荧光）及FITC-UEA-1（绿色荧光）双染阳性,提示培养的细胞为EPCs;（2）提取的外泌体,大小均一,结构完整,呈典型囊泡样结构;粒径集中在30～150 nm,平均峰值位于109.7±15.18 nm;表达外泌体特异性蛋白CD9、CD81以及CD63;PKH26染色阳性,并可被EPCs摄取;（3）与Static-Exos相比,OSS-Exos干预后降低EPCs的体外成血管能力（P<0.01）,升高其增殖能力（P<0.01）,表明OSS-Exos可抑制EPCs的成血管能力,促进其增殖;q RT-PCR和WB结果显示,OSS-Exos干预组EPCs的VE-cadherin、CD31等内皮细胞标记分子表达降低（P<0.05）,而间质细胞标记分子α-SMA和SM22α的表达升高（P<0.05）,提示OSS-Exos可诱导EPCs发生EndoMT;（4）裸鼠体内Matrigel移植物HE染色结果表明,OSS-Exos干预后,EPCs的体内成血管能力降低（P<0.05）,提示OSS-Exos抑制EPCs的体内血管生成;免疫荧光染色结果显示,OSS-Exos预处理EPCs的v WF（P<0.01）、CD31（P<0.05）等内皮细胞标记分子表达降低,而间质细胞标记分子α-SMA和SM22α的表达升高（P<0.01）,提示OSS-Exos促使EPCs发生了EndoMT;（5）q RT-PCR结果显示,与Static-Exos相比较,OSS-Exos中Circ-1199的表达水平较高（P<0.05）;而将两组外泌体分别加入到EPCs培养基后,RNA.FISH结果表明,Circ-1199主要定位于EPCs细胞质内,且OSS-Exos干预组EPCs内Circ-1199的表达量更高（P<0.05）;（6）双荧光素酶报告基因检测结果表明,Circ-1199与let-7g可以靶向结合,let-7g也可以和HMGA2 m RNA的3’UTR靶向结合。OSS-Exos干预EPCs后,q RT-PCR检测结果显示EPCs内Circ-1199的表达水平升高（P<0.05）,let-7g的表达水平下降（P<0.001）,而let-7g靶基因HMGA2的表达量则明显增高（P<0.01）;WB检测结果表明,HMGA2（P<0.01）、p-Smad3/Smad3（P<0.05）、Snail（P<0.05）的蛋白表达均显著上调。结论:（1）应用exo Easy Maxi Kit试剂盒可有效分离纯化EPCs外泌体;（2）体外及体内实验结果均证实,OSS-Exos可诱导EPCs发生EndoMT,进而抑制EPCs的成血管能力,促进其增殖;（3）OSS-Exos可能是通过其富集的Circ-1199发挥分子“海绵”效应来吸附let-7g,从而解除let-7g对靶基因HMGA2的抑制作用,进而激活EndoMT相关转录因子p-Smad3/Smad3、Snail的表达,诱导EPCs发生EndoMT。