小佛肚竹(Bambusaventricosa)愈伤组织再生体系的建立与优化

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通过诱导愈伤组织建立植株再生体系,是竹类植物组织培养研究的难点与热点,而以营养器官为外植体,并通过培养愈伤组织成功建立竹子再生体系的研究更是鲜有报道。本文以小佛肚竹(Bambusa ventricosa)的枝芽为外植体,并通过优化愈伤组织诱导、增殖及分化培养基,成功建立了具较高繁殖系数的小佛肚竹愈伤组织再生体系,同时对小佛肚竹胚性愈伤组织的潮霉素(Hyg)与除草剂(PPT)敏感性进行了初步研究,为最终建立小佛肚竹遗传转化体系奠定了良好的基础。本研究主要结果如下:1、小佛肚竹枝芽愈伤组织诱导的最适配方为MS+6mg/L2,4-D+0.5mg/LNAA+0.001mg/L TDZ。所诱导愈伤组织具有如下两种:I型,为增殖的最佳愈伤组织,黄白色,质地坚硬,松散颗粒状,每个单独的愈伤组织颗粒致密,含水率低,色泽鲜亮;II型,泡状,白色或半透明愈伤组织,其含水率高,具粘性;2、在外植体选择上,以小佛肚竹枝芽上部长约1.5cm的芽尖为最好,愈伤组织诱导率最高,为63.5%;幼芽的下部次之;而枝芽上的叶不能被诱导出愈伤组织。3、I型愈伤组织最佳的增殖培养基配方为:MS+5mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA+1mg/LNAA+100mg/L Vc。I型愈伤组织经增殖培养之后可以得到三种愈伤组织:I-1型,淡白色,致密,颗粒状胚性愈伤组织;I-2型,透明泡状愈伤组织; I-3型,黑白色水泡状愈伤组织。4、诱导I-1型胚性愈伤组织分化的最佳培养基配方为:MS+3mg/L6-BA+0.5mg/LNAA。5、生根配方参照金丝慈竹(Bambusa emeiensis‘Viridiflavus’)的生根配方,即MS+0.5mg/L6-BA+1mg/L NAA+0.1mg/L IBA。生根率为25%。6、I-1胚性愈伤组织对PPT和Hyg均敏感,其中潮霉素的最佳筛选浓度为50mg/L,PPT的最佳筛选浓度为40mg/L。
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