E-cadherin和Integrin αv在牦牛输卵管中的表达及TGF-β1对其表达的影响

来源 :甘肃农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gougou316
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
上皮钙粘蛋白(E-cadherin)和整合素αv(Integrinαv)同属跨膜糖蛋白,参与细胞间及细胞与细胞外基质相互粘附从而发挥相互作用,E-cadherin参与精卵间及精卵与输卵管上皮之间的相互作用且Integrinαv可特异性地识别精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arginine-Glycine-Aspartic,RGD)序列,参与细胞间的粘附,使精子与卵子于输卵管中粘附融合。其在雌性生殖中有着至关重要的作用。雌性牦牛的生殖力低下一直是制约牧区经济发展的关键因素,因此,为探究E-cadherin和Integrinαv在雌性牦牛输卵管中的表达分布及其影响因素,本文做了以下研究:1.E-cadherin在牦牛不同繁殖阶段输卵管不同部位中的表达分布。本研究以卵泡期、黄体期、妊娠期牦牛输卵管伞部、壶腹部和峡部组织样品为材料。采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-Time Polymerase chain reaction,q RT-PCR)、蛋白免疫印迹法(Western-blotting,WB)、免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)等方法对E-cadherin进行表达定位分析。(1)q RT-PCR和Western-blotting结果显示:在卵泡期和妊娠期,E-cadherin基因及蛋白在输卵管壶腹部的表达量最高,显著高于伞部(p<0.05);在黄体期,E-cadherin基因及蛋白在输卵管峡部的表达量最高,显著高于伞部和壶腹部(p<0.05)。(2)E-cadherin主要分布在输卵管伞部、壶腹部和峡部的纤毛细胞、分泌细胞、基细胞、肌层和浆液腺等部位。2.Integrinαv在牦牛不同繁殖阶段输卵管不同部位中的表达分布。本研究以卵泡期、黄体期、妊娠期牦牛输卵管伞部、壶腹部和峡部组织样品为材料。采用q RT-PCR、Western-blotting、IHC等方法对Integrinαv进行表达定位分析。(1)q RT-PCR和Western-blotting结果显示:在卵泡期,Integrinαv基因及蛋白在输卵管伞部的表达量最高,显著高于壶腹部和峡部(p<0.05);在黄体期,Integrinαv基因及蛋白在输卵管峡部的表达量最高,显著高于伞部和壶腹部(p<0.05);在妊娠期,Integrinαv基因在输卵管伞部的表达量最高,显著高于壶腹部和峡部(p<0.05),Integrinαv蛋白在输卵管峡部和伞部的表达差异不显著,但二者显著高于壶腹部(p<0.05)。(2)Integrinαv主要分布在输卵管伞部、壶腹部和峡部的纤毛细胞、分泌细胞、基细胞、肌层和浆液腺等部位。3.转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)对牦牛输卵管上皮细胞(Oviductal epithelial cell,OEC)中E-cadherin和Integrinαv的表达影响,以牦牛输卵管上皮细胞为试验材料,分离培养牦牛输卵管上皮细胞,采用q RT-PCR、Western-blotting和细胞免疫荧光(Immunoflurescence,IF)方法探究TGF-β1对E-cadherin和Integrinαv在牦牛输卵管上皮细胞中的表达影响。(1)IF结果显示:E-cadherin主要在输卵管上皮细胞细胞质中表达,Integrinαv主要在输卵管上皮细胞细胞核和细胞质中表达。(2)TGF-β1对牦牛输卵管上皮细胞中E-cadherin和Integrinαv的表达均有调控作用,其中TGF-β1以剂量依赖型的方式调节E-cadherin的表达,随着TGF-β1浓度的增加,E-cadherin的表达呈上升趋势,Integrinαv的表达随着TGF-β1浓度的增加呈现先下降后上升的趋势。综上所述,本研究通过对E-cadherin和Integrinαv在牦牛不同繁殖阶段输卵管不同部位中的表达分布及TGF-β1对其表达的影响,表明两者均可参与输卵管卵子和受精卵的运输及发育,且OEC细胞中E-cadherin和Integrinαv表达受TGF-β1调控,并具有浓度依赖性。结果为探索E-cadherin和Integrinαv介导TGF-β1调控牦牛早期胚胎发育提供了科学突破点。
其他文献
绵羊是最早被驯化的家养动物之一。在长期的选择过程中,与其野生祖先相比,家绵羊在生理、行为和形态等方面发生了巨大的变化。我国绵羊品种众多、遗传资源丰富,是研究绵羊驯化遗传机制的宝贵素材。本研究对4个中国地方绵羊品种(每个品种10只)和6个培育绵羊品种(每个品种10只)进行全基因组重测序,并结合公共数据库中公布的亚洲摩弗伦野羊、非洲地方绵羊品种、中国地方绵羊品种以及培育绵羊品种的基因组数据,共收集了全
哺乳动物的睾酮合成受很多基因的共同调控,其中某些基因的表达量减少或者缺失都将影响睾酮合成的水平,睾酮缺乏会对生精过程会产生不利影响。研究发现STAR、CYP11A1、HSD3B1、CYP17A1、HSD17B3和GLOD4在雄性动物睾丸中表达,与雄性动物睾酮合成过程以及睾丸功能维持密切相关,但是其在不同物种中的表达特征及发挥的生物学作用存在差异。因此,本研究利用q RT-PCR和Western B
处在繁殖季节的母羊,在生殖激素及特定细胞因子的调节下,卵巢发生一系列生理反应,同时卵泡及黄体的组织结构、细胞形态等也呈现特定的动态变化。关于藏绵羊卵泡发育等卵巢生理的研究,特别是一些细胞因子如VEGF、TGF-β_1和HIF-1α等在卵巢中发挥的生物学作用的相关研究报道较少,研究藏绵羊卵泡与黄体的组织学、细胞学特征,以及相关因子参与卵泡、黄体发育的生物学作用,对深入认识藏绵羊的卵巢生理、通过繁殖调
目的:加强医疗废弃物分类收集、运送、暂时贮存的管理,使医疗废弃物达到无害化处理。方法:根据《医疗废物管理条例》及《医疗卫生机构医疗废物管理办法》制定出适合我院实际情况的医疗废物管理制度及具有可操作性的实施细则。使用不同颜色的废物袋,对固体废弃物进行分类收集。重点加强感染性废弃物的管理,对相关人员进行培训,掌握医疗废弃物分类中的安全防护知识,制定预防锐器损伤的规范
会议
甘露寡糖(mannan oligosaccharides,MOS)作为一种代替抗生素的新型饲料添加剂,在调节单胃动物肠道环境、提高机体免疫力和促进畜禽生长等方面发挥重要作用,在反刍动物方面也可以保持瘤胃健康状态,促进肠道有益菌增殖,影响瘤胃菌群结构,进而提高反刍动物生长性能和免疫功能。因此,本试验选择在湖羊饲粮中添加2%MOS,通过饲养试验、消化代谢试验和屠宰试验等,系统研究MOS对湖羊生长、养分
近年来,养殖业发展迅速,饲料的需求量随之增加,尾菜作物产量大、将其制作成青贮饲料可以缓解粗饲料不足的问题。青贮玉米已经被大量使用,在反刍动物养殖方面取得了不错成果。本试验以育肥期的尕力巴牛为试验对象、以青贮玉米为对照,研究青贮尾菜对尕力巴牛生长性能、屠宰性能、肉品质、血清生化指标、肠道微生物与经济效益方面的影响,为饲用青贮尾菜在反刍动物中的推广提供参考依据。本试验选取10头体重相近、健康的尕力巴牛
牦牛作为青藏高原上所特有可以抗高寒和耐低氧的牛种,是高海拔地区农牧业发展的重要物种。水通道蛋白1(Aquaporin1,AQP1)和水通道蛋白11(Aquaporin11,AQP11)是水通道蛋白家族(Aquaporins,AQPs)成员,在雄性动物精子生成、浓缩和运动等生殖过程中发挥着重要作用。然而,目前在国内外尚未见关于AQPs在雄性牦牛生殖器官中表达的报道。因此,我们选用不同发育阶段的牦牛睾
牦牛(Bos grunnien)作为一种高原特有牛种,在我国的分布范围主要是以青藏高原为中心及其毗邻的高山、亚高山地区,对海拔3000米以上的高山低氧生态环境适应性很强,已经形成了一系列独特的生态生理适应特性。肺离子细胞(pulmonary ionocyte)是2018年新发现的在人类和小鼠肺脏中分布的一种能调节气道表面生理环境的细胞,而且在肺囊胞性纤维化的形成机制中发挥关键作用,对哮喘、慢性阻塞
蜱作为节肢动物中仅次于蚊子的第二大传播媒介,是一种专性吸血且能够传播病毒、血液原虫及细菌等多种病原体的外寄生虫。长角血蜱属于硬蜱科血蜱属,广泛分布于全球多个国家,作为我国的优势蜱种之一,长角血蜱在我国山西等17个省份大量分布。长角血蜱传播的东方泰勒虫及卵形巴贝斯虫对畜牧业的发展造成了巨大影响,而其传播的SFTSV病毒能够引起人发热伴血小板减少综合征,该病的高致死率严重危害到人类的健康。miRNA是