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[目的]：通过检测血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(Eosinophil Cationic Protein,ECP)水平,及嗜酸性粒细胞表面CD25和CD69分子的表达,观察活动期ChlJrg-Strauss综合征(Churg-Strauss syndrome,CSS)患者外周血嗜酸性粒细胞(Eosinophils,EOS)是否处于激活状态.了解活动期Churg-Strauss综合征患者血嗜酸性粒细胞表面及胞浆内蛋白酶活化受体-2(Protease-Activated Receptor-2 PAR一2)的表达.探讨蛋白酶3(Protease 3,PR3)对ChtJrg-Strauss综合征患者外周血嗜酸性粒细胞的激活作用和对细胞表面及胞浆内PAR-2表达的影响,并与IL-5的激活作用进行比较.用抗PAR-2抗体与Churg-Strauss综合征患者外周血嗜酸性粒细胞共同孵育,以了解抗PAR-2抗体能否阻断PR3对嗜酸性粒细胞的激活.同时,我们检测嗜酸性粒细胞表面HLA-DR和CD80/CD86共刺激分子表达以及在IL-5或PR3刺激下分子表达的变化.将PR3与正常人外周血嗜酸性粒细胞孵育30分钟、1小时和24小时后,观察细胞表面和胞浆内PAR-2表达的动态变化,以了解嗜酸性粒细胞表面和胞浆内PAR-2表达的规律.用免疫磁珠法分离并纯化活动期 Churg-Strauss 综合征患者、正常对照和疾病对照外周血嗜酸性粒细胞,ELSIA法检测ECP,流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面及胞浆内PAR-2,细胞表面CD25、CD69、HLA-DR和CD80/CD86共刺激分子的表达.将IL-5或PR3与嗜酸性粒细胞孵育4天,ELSIA法检测培养上清ECP水平,流式细胞仪检测嗜酸性粒细胞表面及胞浆内PAR-2,细胞表面CD25、CD69、HLA-DR和CD80/CD86共刺激分子表达的变化.用抗PAR-2抗体与ChtJrg-Strauss综合征患者外周血嗜酸性粒细胞、PR3孵育后,检测嗜酸性粒细胞表面PAR-2和CD69分子的表达.将正常人外周血嗜酸性粒细胞与PR3孵育30分钟、1小时和24小时后,流式细胞仪检测细胞表面和胞浆内PAR-2表达的动态变化.
[结论]：
1.活动期Churg-Strauss综合征患者血清ECP水平增高,外周血嗜酸性粒细胞表面CD25和CD69分子表达增多.
2.ChurgStrauss综合征外周血嗜酸性粒细胞表面PAR-2低水平表达,并与正常对照和疾病对照之间无显著性差别,而胞浆内PAR-2表达明显高于正常对照和疾病对照.
3.IL-5或PR3的刺激均使Churg-Strauss综合征患者、正常对照和疾病对照来源的血嗜酸性粒细胞表面CD25和CD69分子的表达增高和ECP释放增多.和IL-5类似,PR3也可激活Churg-Strauss综合征、正常对照和疾病对照的血嗜酸性粒细胞.并且IL-5和PR3之间无显著性差异.
4.经PR3刺激后,Chtirg-Strauss综合征患者外周血嗜酸性粒细胞可表达更多的细胞表面PAR-2和胞浆内PAR-2.
5.用可竞争性结合嗜酸性粒细胞表面PAR-2的抗PAR-2抗体与嗜酸性粒细胞孵育,发现抗PAR-2抗体与PR3共同孵育组嗜酸性粒细胞表面PAR-2和CD69分子的表达显著低于仅用PR3刺激组,与阴性对照无差别,提示抗PAR-2抗体可阻断PR3对嗜酸性粒细胞的激活.
6.活动期Churg-Strauss综合征患者、正常对照和疾病对照外周血嗜酸性粒细胞几乎不表达HLA-DR和CD80分子,低表达CD86分子,并且IL-5或PR3的刺激也不能使嗜酸性粒细胞表达更多的HLA-DR和CD80/CD86共刺激分子.
7.用PR3刺激正常人嗜酸性粒细胞30分钟、1小时和24小时后,发现嗜酸性粒细胞表面PAR-2表达以1小时最高,胞浆内PAR-2表达以30分钟最高.而这之后的嗜酸性粒细胞表面和胞浆内PAR-2表达下降,并与阴性对照和刺激前无明显差别.