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目的：噬血细胞淋巴组织细胞增生症(hemophagocytic lymphohistiocytosis，HLH)又称噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome，HPS)。是指一组以良性组织细胞增生和活化伴随其噬血细胞现象的一类综合征。其显著特征为淋巴细胞和组织细胞大量活化、增殖伴高细胞因子血症。包括原发性(遗传性)和继发性(获得性)两种形式。原发性又包括家族性HLH(familtial hemophagocyticlymphohistiocytosis，FHL)和免疫缺陷综合征相关性HLH。FHL是一种少见的常染色体隐性遗传性疾病，预后较差。典型特征表现为发热、血细胞减少、肝脾肿大和组织细胞吞噬血细胞等。其主要标志是缺乏诱导细胞凋亡和细胞毒杀伤细胞活性的能力。目前FHL已被证实与一些基因突变导致编码蛋白的缺陷有关，包括4个亚型(FHL1-4)。FHL2、 FHL3和FHIA分别与PRF1、 UNC13D和STX11基因突变有关，其中以FHL2，FHL3较为常见。PRF1基因突变估计大约占FHL20％-40％，突变率随着种族的不同而不同。目前国内还缺乏穿孔素(PRF1)基因突变和序列变异在儿童HLH中发生情况的研究。本研究拟通过对30例HLH患儿进行穿孔素(PRF1)基因突变筛查。了解穿孔素基因(PRF1)突变和序列变异在中国儿童HLH中的发生情况，并初步探讨基因突变型与临床表现之间可能的关系。
方法：应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)结合直接测序方法对30例中国噬血细胞淋巴组织细胞增生症患儿的PRF1基因外显子编码区及其侧翼内含子区片段进行突变筛查。选择50例无家族遗传病史的中国婴儿脐带血提取的DNA作为对照。所有病例均符合国际组织细胞病协会提出的诊断标准。所有病例人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)抗体阴性，均无HLH家族病史。
结果：
1.在3例HLH患儿中发现的错义突变：在PRF1基因编码区发现3个杂合子突变：c.305G>T，c.503G>A和c.1349C>T,相应的导致了C102F，S168N和T450M的氨基酸变化，而在对照组中未发现，3例患儿在临床上都最初诊断为EBV-HLH。一个患儿为复合性杂合突变(S168N和T450M)，从遗传学角度来说，可明确诊断为家族性噬血细胞淋巴组织细胞增生症亚型2(FHL2)。
2.PRF1基因其他变异：在PRF1基因外显子3发现3个杂合同义突变，c.822C>T，c.900C>T和c.1620A>G，其中c.1620A>G没有引起氨基酸改变(Q540Q)，在SNP数据库(http://www.ensembl.org/index.html和http://www.ncbi.nlm.nih.gov)未报道，该变异在对照组中未发现。c.822C>T和c.900C>T为先前已报道的SNP(SNP登录号：rs885821 and rs885822).在病例组和对照组中均发现，这两个SNP的基因型频率在HLH组和对照组无明显差异(P均>0.05)。
结论：本研究发现表明我国儿童噬血细胞淋巴组织细胞增生症患儿中存在PRF1基因突变，而一些突变位点(C102F，S168N)仅在中国患儿中发现，为国内外首次报道。显示了我国噬血细胞淋巴组织细胞增生症患儿PRF1基因突变具有自身的特点。这些发现有益的评估了PFR1基因突变在我国儿童噬血细胞淋巴组织细胞增生症中的发生情况，同时初步探讨其基因型和临床表现的关系；提示一些少数病例，即使没有噬血细胞淋巴组织细胞增生症家族史和起病年龄较晚，也要考虑为家族性噬血细胞淋巴组织细胞增生症的可能。