论文部分内容阅读
目的:探讨瘢痕灸预处理肝俞、足三里穴对原发性肝癌大鼠Wnt信号传导通路β-连环蛋白(β-catenin)与分泌型卷曲相关蛋白(s FRP1)表达的影响。在信号通路层面研究瘢痕灸预处理预防原发性肝癌发生的可能机制,通过比较并证明选取背俞穴在预防原发性肝癌方面的优势。材料和方法:选择SPF Wistar雄性大鼠并随机选择12只作为空白组。余下的36只大鼠随机分为模型组,预处理的肝俞组和预处理的足三里组,每组12只。模型制作前2周,预处理肝俞组和预处理足三里组均进行瘢痕灸,两组分别在相应的足三里和肝俞穴进行瘢痕灸(0.5g/壮)。每壮使其燃尽。空白组和模型组大鼠给予相同的抓取和固定刺激,但不进行瘢痕灸治疗。两组预处理组在模型组腹腔注射二乙基亚硝(50mg/kg)后,按照规定剂量瘢痕灸后,建立大鼠原发性肝癌模型(HCC)。空白组自由饮水进食,不给予任何处置。实验期间各组大鼠每周测量体重1次,观察体重增减趋势。Western blot法检测β-catenin和s FRP1的表达,HE染色观察肝组织病理学变化。结果:1 HE染色结果显示:与空白组相比,模型组、预处理肝俞组和预处理足三里组大鼠肝组织肝小梁、肝窦呈无序排列,并伴有不同程度的深染;与模型组相比,预处理肝俞组和预处理足三里组癌细胞数量明显减少,其中预处理肝俞组效果更为显著。2体重趋势:10周之前体重均呈现上升趋势,从10周开始,由于造模的进行对肝脏造成损伤导致除空白组外,其余大鼠体重明显下降,第12~14周模型组持续下降,相反预处理足三里组、预处理肝俞组体重均出现上升。各组大鼠10、12、14周的体重,与空白组比较,模型组、预处理足三里组、预处理肝俞组体重出现显著差异(P<0.05);与模型组比较,预处理足三里组、预处理肝俞组体重有显著差异(P<0.05)。3 Western Blot结果显示:与空白组比较,模型组、预处理足三里组、预处理肝俞组的s FRP1表达量明显下降(P<0.05),β-catenin的表达量明显升高(P<0.05);与模型组比较,预处理足三里组和预处理肝俞组s FRP1表达量明显升高(P<0.05);β-catenin的表达量显著降低(P<0.05);与预处理足三里组比较,预处理肝俞组s FRP1表达量明显升高(P<0.05),β-catenin的表达量降低(P<0.05)。结论:1瘢痕灸肝俞和足三里可以调节Wnt信号通路中β-catenin、s FRP1、的蛋白表达水平,有效减少癌细胞的增殖。2瘢痕灸肝俞和足三里对原发性肝癌均有不同程度的预防作用,通过分析比较各指标间的差异,肝俞穴的作用效果要优于足三里穴,故本研究认为瘢痕灸肝俞穴治疗原发性肝癌具有更加显著的特异性。