铁皮石斛调节肠黏膜免疫活性多糖的筛选与结构鉴定

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lohansun
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铁皮石斛经醇提、水提、醇沉处理,获得醇提物、水提物、水提醇溶物、水提醇沉物、未透析总多糖和透析后粗多糖(DOP),DOP经 DEAE-Cellulose阴离子交换层析分离得水洗糖DOP-W(92.18%)和盐洗糖DOP-S(3.07%),对DOP-W进行40%、60%和80%分级醇沉得到 DOP-W1(5.56%)、DOP-W2(32.65%)和DOP-W3(43.70%)三种组分,DOP-W3再经Sephadex G-100凝胶柱纯化获三种多糖组分DOP-W3-a(11.31%)、DOP-W3-b(17.27%)和DOP-W3-c(37.39%)。通过对上述组分进行体外肠黏膜免疫活性评价,筛选高活性组分DOP-W3-b。  小鼠口服 DOP-W3-b的免疫活性实验表明,DOP-W3-b可改善肠粘膜形态结构,并通过Peyer’s结和MLN中免疫细胞刺激淋巴细胞因子的分泌、促进肠黏膜固有层浆细胞SIgA的合成,从而实现对肠黏膜系统免疫活性的调节。  运用HPLC、GC、GC-MS和NMR等分析技术对DOP-W3-b的结构特征进行解析表明,DOP-W3-b是相对分子质量为1.543×104 Da的均一组分,由甘露糖和葡萄糖按4.50:1.00摩尔比组成,其主链主要由β-(1→4)-D-Manp、β-(1→4)-D-Glcp和β-(1→3,6)-D-Manp重复构成,支链由β-(1→4)-D-Manp、β-(1→4)-D-Glcp和β-1-D-Glcp连接组成,其中β-(1→4)-D-Manp的2-位被乙酰基基团取代。
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