人工合成的含氟化合物在人类的生产和生活中扮演着不可或缺的角色。随着人类需求的不断增加,全氟化合物、含氟农药等含氟化合物的生产与使用量也逐渐增加,对人体健康和生态环境都构成了极大威胁。近年来,已有相关研究报道了含氟化合物对生物体的代谢影响,从分子水平揭示含氟化合物对生物体的毒害作用,有助于更加全面认知含氟化合物的潜在危害。色谱-质谱联用技术由于在分析生物样品内源性代谢物方面表现出较高的灵敏度和稳定性,已被广泛地应用于探究环境污染物对生物体的代谢影响。然而,利用色谱-质谱联用技术分析生物样品需进行一系列的预处理操作,不仅费时费力,而且可能会使样品中活性成分损失,造成研究结果存疑。内部萃取电喷雾电离质谱（internal extractive electrospray ionization mass spectrometry,i EESI-MS）是一种无需样品预处理即可实现组织样品内部分子信息快速和直接获取的常压质谱（Ambient mass spectrometry）分析技术。本研究基于i EESI-MS技术,建立斑马鱼和罗非鱼组织样品内源性代谢物的直接检测方法,并应用于探究典型的含氟农药和全氟化合物对鱼类的代谢扰动影响。本论文的主要研究内容包括以下两部分:（1）基于i EESI-MS技术探究氟虫腈及其衍生物对斑马鱼的代谢影响。首先,通过电离电压和萃取剂流速优化实验,建立i EESI-MS方法用于斑马鱼肝脏样品内源性代谢物的非靶向分析。i EESI-MS分析结果显示:斑马鱼肝脏中多种代谢物可被直接检出,包括小分子代谢物、溶血磷脂酰胆碱（Lyso PC）和磷脂酰胆碱（PC）等。最终,通过对混合（氟虫腈及其三种衍生物）暴露组、氟虫腈暴露组和控制组的i EESI-MS数据进行多元统计分析,共有22种代谢物被认定为暴露组相较于控制组的差异性代谢物,包括PC（34:1）、PC（40:8）和Lyso PC（16:0）等。此外,通过对比PC信号强度可发现混合暴露相较于氟虫腈暴露对斑马鱼肝脏中11种PC的代谢扰动更加明显。以上实验结果表明氟虫腈暴露、混合暴露均可导致斑马鱼肝脏代谢紊乱,且混合暴露表现出更加显著的代谢影响。（2）i EESI-MS探究全氟辛酸（PFOA）对罗非鱼的磷脂代谢影响。通过萃取剂优化实验,建立i EESI-MS方法用于分析罗非鱼组织样品中的磷脂分子。i EESI-MS分析结果显示:以CH3OH/H2O（80:20,v/v）和CH3OH/H2O/NH4OH（80:20:0.3,v/v/w）分别作为i EESI-MS正离子和负离子检测模式的萃取剂,可获取罗非鱼肝脏和脾脏组织中七大类磷脂分子信息,包括PC、神经鞘磷脂（SM）、甘油磷脂酸（PA）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）、磷脂酰甘油（PG）和磷脂酰丝氨酸（PS）。高浓度PFOA暴露组、低浓度PFOA暴露组和控制组i EESI-MS数据的多元统计分析结果显示:罗非鱼的肝脏和脾脏中分别有20和18种磷脂分子被认定为PFOA暴露组相较于控制组的差异性磷脂。代谢通路分析结果显示PFOA暴露可导致罗非鱼的甘油磷脂代谢途径受到显著影响,说明了PFOA对鱼类的潜在危害。