【摘 要】
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肌内脂肪含量和背膘厚度是评价猪肉品质的重要经济性状,其中背膘厚度主要取决于皮下脂肪的含量。因此,在不影响猪肉风味品质的前提下,降低皮下脂肪的沉积量是进行猪肉品质调控的关键举措。姜黄素(Curcumin,CUR)是从植物姜黄的根茎中提取出的一种多酚类物质,具有降血脂、改善脂代谢等多种生物学功能。然而,CUR在猪皮下脂肪沉积中的调控作用尚不清楚,其分子机制也有待进一步揭示。本研究包括以下4个部分。1.
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(NO.32072809,31501923); 江苏省自然科学基金项目(BK20150443); 中国博士后科学基金面上项目(NO.2015M581872); 江苏省博士后科学基金A类资助(NO.1501073A); 扬州大学高
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肌内脂肪含量和背膘厚度是评价猪肉品质的重要经济性状,其中背膘厚度主要取决于皮下脂肪的含量。因此,在不影响猪肉风味品质的前提下,降低皮下脂肪的沉积量是进行猪肉品质调控的关键举措。姜黄素(Curcumin,CUR)是从植物姜黄的根茎中提取出的一种多酚类物质,具有降血脂、改善脂代谢等多种生物学功能。然而,CUR在猪皮下脂肪沉积中的调控作用尚不清楚,其分子机制也有待进一步揭示。本研究包括以下4个部分。1.姜黄素对PSPA葡萄糖摄取和分化聚酯的影响。本实验以猪皮下脂肪前体细胞(Porcine subcutaneous preadipocytes,PSPA)为模型,探讨 CUR 对 PSPA 葡萄糖摄取和分化聚酯的影响。结果表明,低浓度CUR(10、15、20 μmol/L)对PSPA增殖和细胞毒性均无明显影响,但高浓度CUR(30μmol/L)处理显著抑制了 PSPA的增殖活力,呈现明显的细胞毒性作用。此外,CUR显著降低了细胞对葡萄糖的摄取、细胞内TG含量及G3PDH活性。结果表明CUR处理显著抑制了 PSPA的葡萄糖摄取和分化聚酯。2.姜黄素抑制PSPA葡萄糖摄取和分化聚酯的作用机制。本试验继续以PSPA为模型,进一步探讨低浓度CUR抑制葡萄糖摄取和分化聚酯的作用机制。结果表明:CUR处理显著抑制了 ERK1/2的mRNA表达及磷酸化水平。此外,ERK1/2下游脂肪细胞分化关键转录因子PPAR-γ、C/EBP-α和SREBP-1c,脂肪酸合成限速酶FAS和ACC,脂肪酸结合蛋白AP2和葡萄糖转运蛋白GLUT4的表达,以及PPAR-γ转录活性在CUR处理组均显著下降,而Pref-1的表达显著升高。以上结果表明,CUR可能通过抑制ERK1/2-PPAR-γ信号通路,抑制PSPA分化聚酯。因此,本部分试验进一步探讨了 ERK通路激活(FGF-2预处理30 min)对CUR抑制分化聚酯的“扭转”作用。结果表明,与DM+CUR组相比,FGF-2+DM+CUR 组中 ERK1/2 的磷酸化水平显著升高,PPAR-γ,C/EBP-β、FAS、ACC和GLUT4的表达也显著升高,而TG含量和细胞上清葡萄糖消耗量均显著下降。表明低浓度CUR主要通过抑制ERK1/2-PPAR-γ通路,抑制PSPA的葡萄糖消耗和分化聚酯,进而降低猪脂肪细胞内脂质沉积。3.姜黄素通过诱导前体脂肪细胞凋亡抑制分化聚酯的研究。本实验选择高浓度CUR探讨前体脂肪细胞凋亡在CUR抑制PSPA分化聚酯中的作用。结果表明,CUR处理显著抑制细胞中BCL-2的表达,促进BAX的表达且BAX/BCL-2比值显著升高;此外,CUR处理组细胞中Caspases-3,-8,-9的表达及Cleaved-caspases-3,-8,-9的表达均显著升高。另外,在3T3-L1细胞上的重复实验结果表明,CUR处理可将细胞阻滞在S和G2/M期,显著抑制细胞增殖。此外,CUR处理显著增加了 BAX表达量,增加细胞凋亡率。结果表明,高浓度CUR可能通过触发前体脂肪细胞凋亡,抑制PSPA分化聚酯。4.姜黄素对高脂日粮小鼠脂质沉积的缓解作用研究。前文研究发现,CUR在离体水平上能够抑制脂肪细胞的葡萄糖摄取与分化聚酯,为了探讨CUR能否在活体水平上调节脂质沉积,试验以高脂诱导的C57BL/6J肥胖小鼠为模型,在日粮中分别添加0.1%、0.5%和1%的CUR,观察其对小鼠脂质沉积的影响。结果表明,日粮添加CUR可显著降低小鼠血糖含量、血清胰岛素水平、附睾脂肪组织和肝脏组织中TG、TCHO含量,增强小鼠对葡萄糖的耐受。此外,CUR处理组肝脏组织中脂质沉积量、肝糖原含量均显著下降;附睾脂肪组织中脂肪细胞的平均面积、周长及体积均显著减少。结果表明,日粮中添加CUR可显著改善高脂饮食诱导的过度脂质沉积和胰岛素抵抗。综上,研究结果表明:低浓度CUR能够通过抑制ERK1/2-PPAR-γ信号通路,抑制脂肪细胞对葡萄糖的摄取和脂肪酸的从头生成,降低猪脂肪细胞内脂质沉积。高浓度CUR通过增加BAX/BCL-2比率以及Caspases-3,-8和-9的表达,触发脂肪细胞凋亡,抑制脂质沉积。研究结果为将CUR作为一种绿色、安全、有效的新型降脂饲料添加剂在畜牧兽医生产上的应用提供理论依据。
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