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[目的]观察高浓度皮质酮损伤的大鼠海马神经细胞与学习记忆相关的信号转导蛋白基因表达的变化及补肾方药的主药熟地主要成分-甘露三糖与5-羟甲基糠醛(5-HMF)的作用。[方法]采用出生24h内的SD乳鼠大脑海马组织，原代培养海马神经细胞，第8天用高浓度(10-4M)皮质酮处理细胞，制作皮质酮损伤型海马神经细胞病理模型。实验分设六组：(1)正常组；(2)模型组(10-4MCORT)；(3)拮抗剂组(10-4MCORT+3nMRU38486)；(4)甘露三糖组(10-4MCORT+0.10g/L甘露三糖)；(5)5-HMF组(10-4MCORT+0.50mg/L5-HMF)；(6)阳性对照组(10-4MCORT+40uM多奈哌齐)。普通光镜下观察大鼠海马神经细胞形态；NSE-免疫细胞化学技术法鉴定神经细胞；Nissl染色和Syto13/PI双重荧光染色法观察细胞存活情况；MTT法检测细胞活力；按试剂盒说明方法测定β-半乳糖苷酶活性：SYBRGreenⅠRealtime-PCR检测细胞GCR、BDNF、SGK、NR2B、ERK、ⅠκBa、SynapsinⅠ的mRNA表达；Westernblot检测细胞GCR、BDNF、SGK、NR2B、P-ERK、p-CREB、p-SynapsinⅠ的蛋白表达变化，及甘露三糖与5-羟甲基糠醛对模型细胞上述各项指标变化的纠正作用。[结果](1)与正常组比较：模型组的死细胞明显增多；细胞活力下降；β-半乳糖苷酶活性显著升高；GCR、BDNF、SGK、ERK、SynapsinⅠmRNA表达显著下降，NR2B与ⅠκBa无明显变化；GCR、BDNF、SGK、NR2B、P-ERK、P-CREB、P-SynapsinⅠ蛋白表达均显著下降。拮抗剂RU38486能明显提高模型细胞的存活及其活力和GCR、BDNF、SGK的蛋白表达，显著降低模型细胞的β-半乳糖苷酶活性。(2)与模型组比较，甘露三糖组与5-HMF组细胞的存活及其活力显著上升，β-半乳糖苷酶活性显著下降。(3)与模型组比较：甘露三糖组细胞的GCR、SGK、ERK、SynapsinⅠ的mRNA表达显著升高，而BDNF、NR2B、ⅠκBa的mRNA表达无明显变化；5-HMF组细胞的GCR、BDNF、NR2B、ERK、SynapsinⅠ的mRNA表达显著升高，而SGK、ⅠκBa的mRNA表达无统计学意义。(4)与模型组比较：甘露三糖组细胞的GCR、SGK、P-ERK、P-CREB、P-SynapsinⅠκ的蛋白表达显著升高，而BDNF、NR2B的蛋白表达无明显变化：5-HMF组细胞的GCR、BDNF、NR2B、P-ERK、P-CREB、P-SynapsinⅠκ的蛋白表达显著升高，而SGK的蛋白表达无统计学意义。[结论](1)原代培养乳鼠海马神经细胞至第8天，加入1×10-4M皮质酮处理培养细胞24h，可以制得皮质酮损伤的大鼠海马神经细胞病理模型，即“拟衰老性学习记忆退化”的海马神经细胞模型；(2)皮质酮对海马神经细胞的损伤及学习记忆信号转导相关基因SGK、BDNF的改变是由GCR介导的；(3)熟地的主要成分甘露三糖主要是通过GCR-SGK-ERK-CREB-SynapsinⅠ信号转导通路，5-HMF主要是通过GCR-BDNF-NR2B-ERK-CREB-SynapsinⅠ信号转导通路上调模型细胞学习记忆相关蛋白分子的基因表达，并提高模型细胞的存活及其活力，降低衰老特异性的β-半乳糖苷酶活性，以保护大鼠海马神经细胞免遭高浓度皮质酮的损伤作用。推测甘露三糖和5-HMF可能是补肾方药的君药-“熟地”发挥延缓学习记忆退化的主要活性成分。